基質(zhì)金屬蛋白酶及其組織抑制劑在牙周炎動物模型牙周組織中表達的研究.pdf

1、牙周病是一組由菌斑細菌引起的炎癥性疾病，是人類口腔的常見病、多發(fā)病，也是成人失牙的主要原因；牙周病的病因及發(fā)病機理非常復雜，到目前為止，人們對它的認識尚不十分清楚：在牙周病的發(fā)生發(fā)展過程中，尤其是在牙周組織的破壞和降解過程中，基質(zhì)金屬蛋白酶家族(matrixmetalloproteinases，MMPs)發(fā)揮著重要的作用。MMPs是一類酶活性中心含有二價鋅離子、且蛋白結(jié)構(gòu)相似、編碼基因與膠原酶基因同源的蛋白分解酶家族。目前已發(fā)現(xiàn)的MMP

2、s有20多種，分為6大類：膠原酶、明膠酶、基質(zhì)溶解酶、基質(zhì)降解素、膜型基質(zhì)金屬蛋白酶及其他MMPs。研究較透徹的MMPs有7種，主要是三類：膠原酶、明膠酶和基質(zhì)分解素類。MMP-1和MMP-8屬于膠原酶，主要降解Ⅰ～Ⅲ型膠原及Ⅶ和Ⅹ型膠原?；|(zhì)金屬蛋白酶組織抑制劑(tissue inhibitor ofmetalloproteinase，TIMPs)是能特異性地抑制MMPs活性的一組多功能因子，TIMPs家族由4個成員組成：TIMP-1

3、，TIMP-2，TIMP-3和TIMP-4。由于牙周組織取材困難，目前對MMPs和TIMPs的研究多集中于牙周炎患牙部位的牙齦組織和齦溝液中的表達情況，而要進一步了解二者在牙周病變過程中的作用，尚需對其在牙周炎患牙牙周膜及牙槽骨中的分布及水平進行研究。因此，本文聯(lián)合使用高糖飼料喂飼、絲線結(jié)扎動物牙頸部和口腔局部接種牙周可疑致病菌的方法，建立不同時期、不同嚴重程度的大鼠牙周炎模型，獲得牙周炎的病變組織，采用免疫組化的方法對MMP-1、MM

4、P-8、TIMP-1和TMP-2在病變牙周組織的表達進行定位及半定量分析，結(jié)果顯示：1)．上述建模方法的聯(lián)合使用可以獲得較為理想的不同時期、不同嚴重程度的大鼠牙周炎模型。2)．MMP-1、MMP-8在牙周炎病變組織中，隨著炎癥進程呈現(xiàn)不同特征性的表達：在健康大鼠牙周組織部位有弱陽性表達，在牙齦炎、牙周炎的牙齦上皮中呈強陽性表達，在牙周炎的牙廚組織中，主要在牙周膜成纖維細胞、破骨細胞等細胞中呈強陽性表達。MMP-1、MMP-8在各組大鼠牙

5、周炎模型牙周組織中表達的變化趨勢為：由健康牙周組織的弱陽性表達，變?yōu)榧毙札l炎、急性牙周炎時的強陽性表達，到慢性牙周炎時期，表達較急性期有所降低。3)．TMP-1，TIMP-2在正常大鼠的牙齦上皮組織中幾乎不表達，在牙周膜成纖維細胞、牙槽骨邊緣細胞(前成骨細胞)中有較弱的表達，而在牙周炎病變組織中的表達明顯增強；在牙周炎的急性期和慢性期TMP-1，TIMP-2的水平呈現(xiàn)隨炎癥程度變化而變化的趨勢，但TIMP-1,TIMP-2表達水平的這種

6、變化尚不具有統(tǒng)計學意義。 本文結(jié)果顯示：高糖水喂飼+牙頸部絲線結(jié)扎在28天時可使大鼠形成典型的牙周炎；采用高糖水+牙頸部絲線結(jié)扎+接種P.gingivalis，能在14天時觀察到急性重度牙周炎的表現(xiàn)，28天時病變進入慢性期；而采用高糖水+牙頸部絲線結(jié)扎+接種混合菌的方法，能獲得更嚴重的牙周炎病變模型。 MMP-1、MMP-8在大鼠牙周炎模型牙周組織中表達，隨著炎癥進程呈現(xiàn)不同的水平表達：在健康大鼠牙周組織有弱陽性表達，在

7、牙齦炎、牙周炎的牙齦上皮中呈強陽性表達，在牙周炎的牙周組織中，主要在牙周膜成纖維細胞、破骨細胞等細胞中呈強陽性表達，MMP-1、MMP-8在各組大鼠牙周炎模型牙周組織中表達的變化趨勢為：由健康牙周組織的弱陽性表達，變?yōu)榧毙札l炎、急性牙周炎的強陽性表達，到慢性牙周炎時期，表達水平較急性期降低；TIMP-1和TIMP-2在牙周炎癥組織中，隨著炎癥進程呈現(xiàn)不同水平的表達：在健康大鼠牙周組織部位有弱陽性表達，在牙齦炎、牙周炎的炎細胞浸潤區(qū)域，炎

8、細胞、破骨細胞及牙周膜成纖維細胞中呈強陽性表達。TIMP-1和TIMP-2在各組大鼠牙周炎模型牙周組織中表達的變化趨勢為：由健康牙周組織的弱陽性表達，變?yōu)榧毙札l炎、急性牙周炎時的強陽性表達，到慢性牙周炎階段，表達水平較急性期呈現(xiàn)降低的趨勢；表明MMP-1、MMP-8及、TIMP-1、TIMP-2的表達水平隨著牙周炎病變的發(fā)生發(fā)展而發(fā)生變化，呈現(xiàn)出與牙周組織炎癥程度相一致的變化趨勢，提示MMPs及TIMPs參與了牙周炎癥的發(fā)生發(fā)展及牙周組