洛陽地區(qū)規(guī)?；u場隱孢子蟲流行病學調(diào)查及PCR檢測.pdf

1、隱孢子蟲病是一種以腹瀉為主要癥狀的人畜共患病，隱孢子蟲宿主范圍廣泛，可寄生于包括人在內(nèi)的240余種動物，嚴重威脅著人和動物的健康。禽類隱孢子蟲病是家禽及鳥類最常見的寄生蟲病之一，現(xiàn)已報道至少有30種禽類可感染隱孢子蟲，主要引起消化道和呼吸道癥狀；也可通過水源導致人畜患病，是一個嚴重的公共衛(wèi)生問題。本試驗對洛陽地區(qū)規(guī)?；u場隱孢子蟲病流行情況進行了調(diào)查，通過對分離到的隱孢子蟲從形態(tài)學、人工感染試驗、卵囊排出規(guī)律、18S rRNA序列分析，

2、鑒定出洛陽地區(qū)雞源隱孢子蟲的流行種類，確定了該地區(qū)雞源隱孢子蟲分離株及與其它種類隱孢子蟲之間的分子種系相似性，為預防和治療人獸共患隱孢子蟲病提供了科學依據(jù)。
　　為了掌握洛陽地區(qū)雞隱孢子蟲病的流行狀況，自2011年5月～2012年4月，利用飽和蔗糖溶液漂浮法和改良抗酸染色法對8個規(guī)模化雞場采集的359份糞樣進行了隱孢子蟲卵囊檢查。檢查結(jié)果顯示：洛陽地區(qū)雞場隱孢子蟲感染總陽性率為15％（54/359），主要集中在50日齡以下的雛雞。

3、發(fā)現(xiàn)2種不同形態(tài)的卵囊，初步鑒定為貝氏隱孢子蟲和火雞隱孢子蟲。
　　為了進一步驗證隱孢子蟲的蟲種，對3日齡雛雞嗉囊接種，進行人工感染試驗，觀察其排卵囊規(guī)律和臨床表現(xiàn)。試驗結(jié)果顯示：潛隱期為4天，高峰期出現(xiàn)在感染后第8天，高峰期持續(xù)時間為8～15天。對病雞隱孢子蟲主要寄生部位進行黏膜涂片和改良抗酸染色以及對組織進行石蠟切片 H.E染色，結(jié)果僅在氣管和法氏囊部位發(fā)現(xiàn)卵囊，為貝氏隱孢子蟲常寄生部位。
　　對本次分離到的2個雞源隱孢

4、子蟲分離株，采用常規(guī) PCR方法基于18S rRNA基因位點進行擴增，擴增片段經(jīng)測序和序列比對，進行進化發(fā)育分析，鑒定其種類。結(jié)果顯示：從洛陽地區(qū)分離到的2個隱孢子蟲分離株和貝氏隱孢子蟲在同一進化分枝上，親緣性較近，為同一蟲種，同源性為100%，確定洛陽地區(qū)雞源隱孢子蟲分離株為貝氏隱孢子蟲。本次研究結(jié)果表明，洛陽地區(qū)雞已存在隱孢子蟲病，為規(guī)?；u場對本地區(qū)公共衛(wèi)生健康的風險性評估提供了數(shù)據(jù)和科學依據(jù)，為動物及人隱孢子蟲病的防治奠定了良好