血管緊張素AT2受體對(duì)多巴胺能神經(jīng)元的保護(hù)作用及其機(jī)制.pdf

1、帕金森病(Parkinson's disease，PD)是以中腦黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元變性缺失和神經(jīng)元內(nèi)路易小體形成為病理特征的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病。氧化應(yīng)激在PD的神經(jīng)變性發(fā)病機(jī)制級(jí)聯(lián)反應(yīng)中起重要的作用。中樞神經(jīng)系統(tǒng)存在相對(duì)獨(dú)立的RAS，其參與神經(jīng)元退行性變的發(fā)病過程。NADPH氧化酶與RAS密切相關(guān)，是活性氧的最主要來源，在神經(jīng)變性級(jí)聯(lián)反應(yīng)中起關(guān)鍵性的作用。在年齡相關(guān)的神經(jīng)退行性疾病中，血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)通過AT1受體激活NADPH

2、氧化酶，加重氧化應(yīng)激。我們采用CGP42112激活A(yù)T2受體，觀察AT2受體激活能否直接對(duì)魚藤酮誘導(dǎo)CATH.a氧化損傷產(chǎn)生保護(hù)作用。
　　本研究采用魚藤酮誘導(dǎo)CATH.a損傷制作PD細(xì)胞模型，分別使用PBS、魚藤酮、AngⅡ、CGP42112、PD123319單獨(dú)或聯(lián)合處理細(xì)胞，檢測AT1和AT2受體，NADPH氧化酶活性及亞單位表達(dá)，SOD、GSH和ROS等氧化指標(biāo)變化。分別采用qRT-PCR和westernblotting檢

3、測AT1、AT2受體、NADPH氧化酶亞單位mRNA和蛋白的表達(dá)。通過MTT和臺(tái)盼藍(lán)拒染實(shí)驗(yàn)確認(rèn)細(xì)胞存活率，SOD活性檢測試劑盒、總GSH測試劑盒檢測SOD活性及GSH含量，超氧化物陰離子熒光探針(DHE)檢測細(xì)胞內(nèi)ROS水平。研究發(fā)現(xiàn)，CGP42112(100 nM)顯著增加SOD活性及GSH含量，降低魚藤酮誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激。另外，CGP42112顯著增加AT2受體表達(dá)，降低AngⅡ誘導(dǎo)的NADPH氧化酶激活，而此作用可以被AT2受體拮