輸血相關(guān)急性肺損傷大鼠模型建立及相關(guān)基因表達(dá)的研究.pdf

1、目的：
　　建立SD大鼠TRALI模型，并研究輸血相關(guān)急性肺損傷SD大鼠肺組織血管生成素2（Ang-2）和白介素10（IL-10）基因相對(duì)表達(dá)量與血漿、肺組織Ang-2、IL-10濃度變化及相關(guān)性[69]。
　　方法：
　　第一部分：TRALI模型組采用SD大鼠腹腔內(nèi)注射脂多糖（2mg/kg）2h后移除等于SD大鼠10％血容量的血液（約1ml）并靜脈輸注等量人血漿建立[21]。陽(yáng)性對(duì)照組經(jīng)靜脈輸注脂多糖（5mg/kg）

2、直接誘導(dǎo)出急性肺損傷[21]。設(shè)正常（陰性）對(duì)照1組，經(jīng)腹腔注射生理鹽水（0.5ml/只）2h后移除等于SD大鼠10%血容量的血液（約1ml）并輸注等體積生理鹽水[21]；正常（陰性）對(duì)照2組，經(jīng)腹腔注射脂多糖（2.0 mg/kg）2h后移除等于SD大鼠10%血容量的血液（約1ml）并輸注等體積生理鹽水[21]；正常（陰性）對(duì)照3組，經(jīng)腹腔注射生理鹽水（0.5ml/只）2h后移除SD大鼠10%血容量的血液（約1ml）并輸注等體積人血漿[

3、21]。
　　留取各組大鼠肺組織樣本并進(jìn)行病理觀察及免疫組織化學(xué)染色，計(jì)算其濕/干比，建立肺組織病理評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)檢測(cè)各組大鼠血液血管腦鈉肽水平。對(duì)肺組織病理綜合學(xué)評(píng)分、肺組織濕/干比、大鼠血液血管腦鈉肽水平結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　第二部分：應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測(cè)正常（陰性）對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組、TRALI組SD大鼠肺組織Ang-2、IL-10基因相對(duì)表達(dá)量[69],以管家基因b-actin為對(duì)照,2-（△△Ct）

4、法計(jì)算目的基因相對(duì)表達(dá)量[69]；同時(shí)應(yīng)用ELISA法檢測(cè)各組大鼠血漿、肺組織中Ang-2和IL-10濃度[69]。對(duì)各組Ang-2、IL-10基因相對(duì)表達(dá)量及細(xì)胞因子濃度進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析并計(jì)算其相關(guān)性。
　　結(jié)果：
　　應(yīng)用腹腔內(nèi)注射脂多糖（2mg/kg）1h后移除等于SD大鼠10%血容量的血液（約1ml）并靜脈輸注等量人血漿能誘導(dǎo)出TRALI SD大鼠模型，其肺病理變化符合急性肺損傷病理診斷標(biāo)準(zhǔn)。
　　TRALI組肺

5、組織與正常對(duì)照組相比較，Ang-2基因相對(duì)表達(dá)量下調(diào)[69]，IL-10基因相對(duì)表達(dá)量上調(diào)[69]。TRALI組血液、肺組織中Ang-2和IL-10細(xì)胞因子濃度較正常對(duì)照組明顯增高[69]。
　　結(jié)論：
　　本實(shí)驗(yàn)研究所建立的SD大鼠經(jīng)腹腔注射LPS2 mg/kg[21,69]，再輸注10%總血容量的人血漿誘導(dǎo)的SD大鼠TRALI模型經(jīng)病理結(jié)果證實(shí)[21,69]，其方法學(xué)具有可行性、實(shí)用性與穩(wěn)定性。在SD大鼠TRALI模型的