新型高效IDO抑制劑的篩選及其在腫瘤治療中的作用研究.pdf

1、吲哚胺2，3-雙加氧酶(Indoleamine2，3-Dioxygenase，IDO)是色氨酸犬尿氨酸途徑(kynurenine pathway，KP)的限速酶，催化色氨酸代謝產(chǎn)生L-犬尿氨酸，喹啉酸等具有細(xì)胞毒性的代謝產(chǎn)物。研究證實(shí)IDO已經(jīng)成為治療人類(lèi)多種重大疾病的重要靶點(diǎn)，如腫瘤、神經(jīng)系統(tǒng)疾病以及其他一些色氨酸代謝異常的疾病。研發(fā)IDO抑制劑作為相關(guān)治療藥物具有重要的現(xiàn)實(shí)意義，但目前只有少數(shù)的IDO抑制劑被發(fā)現(xiàn)。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)一種天然

2、化合物CX在體外酶活水平具有顯著的IDO抑制活性。經(jīng)結(jié)構(gòu)修飾合成一系列CX衍生物后，通過(guò)篩選和酶動(dòng)力學(xué)常數(shù)測(cè)定，最后獲得13個(gè)具有較高IDO抑制活性的CX系列化合物，其抑制效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于目前體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中普遍使用的IDO抑制劑1-甲基色氨酸(1-MT)，并且對(duì)細(xì)胞內(nèi)的IDO同樣具有抑制效果。其中3個(gè)化合物的Ki值和IC50值已達(dá)到納摩爾級(jí)別。通過(guò)分子對(duì)接實(shí)驗(yàn)，我們確定了這3個(gè)化合物和其母化合物CX與IDO酶的結(jié)合方式。另外，在混合淋巴細(xì)胞反

3、應(yīng)體系中，CX系列化合物能夠明顯促進(jìn)T細(xì)胞的增殖。為了進(jìn)一步探索CX系列作為高效的IDO抑制劑是否具有體內(nèi)抗腫瘤作用，我們采用了Lewis肺癌小鼠模型，發(fā)現(xiàn)CX-47能夠顯著抑制腫瘤生長(zhǎng)，并且降低小鼠血清中IDO的活性;此外，CX-47還能抑制Foxp3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Tregs)的數(shù)量，而Foxp3+Tregs可以通過(guò)細(xì)胞間接觸和產(chǎn)生抑制性細(xì)胞因子來(lái)發(fā)揮局部免疫抑制作用。以上結(jié)果顯示，CX-47作為一個(gè)新型高效的小分子IDO抑制劑可能