基于中醫(yī)“標本兼治”研究益智仁鹽炙“溫腎縮尿”作用機理.pdf

1、益智為姜科山姜屬植物益智AlpiniaoxyphyllaMiq.的干燥成熟果實，是中醫(yī)臨床常用的一味中藥。在國家“十一五”期間，基于益智仁“生品入脾，鹽炙入腎，生熟有別”的傳統(tǒng)認識，我們對其展開了系統(tǒng)深入的研究，初步闡明了益智仁“生品入脾·止瀉，鹽炙入腎·縮尿”中藥炮制理論的科學內涵。
　　目的：
　　本課題在國家自然科學基金面上項目“益智仁‘鹽炙入腎-溫腎縮尿’的物質基礎和作用機理研究”（30973941）的支持下，對益智

2、仁溫腎縮尿的物質基礎和作用機理進行研究。前期以小鼠水負荷多尿模型為基礎，已完成鹽益智仁縮尿有效部位篩選和部分機理研究。本文在前期基礎上，建立兩種大鼠多尿模型對有效部位縮尿作用進行驗證和評價，并按照中醫(yī)標本兼治的用藥原則，設計“溫腎”為本，“縮尿”為標藥理指標，探討其作用機理。
　　方法：
　　采用文獻學、藥理學和化學相結合的手段開展益智仁鹽炙“溫腎縮尿”作用機理研究。
　　1采用文獻學方法，整理回顧益智仁、多尿動物模型

3、的現(xiàn)代研究進展，為實驗研究提供理論依據(jù)。
　　2采用藥理學方法，建立兩種大鼠多尿模型，對鹽益智仁有效部位縮尿作用進行驗證和評價，并比較鹽炙前后作用差異。
　　3以腎陽虛多尿模型為基礎，從臟器指數(shù)、病理形態(tài)變化、血清BUN、Cr含量和全血CD3/CD4/CD8表達等方面探討益智仁鹽炙“溫腎”作用；從“抗利尿激素-環(huán)磷酸腺苷-水通道蛋白”信號途徑研究“縮尿”作用機制。
　　4采用血清藥物化學方法，對鹽益智仁有效部位“入血成

4、分”進行分離鑒別，并以其為指標，比較益智仁鹽炙前后藥代動力學變化，從體內過程變化探討益智仁“生熟有別”科學內涵。
　　結果：
　　1對水負荷多尿模型大鼠，益智仁石油醚部位在9g·kg-1劑量時能顯著降低其0～1h段尿量（P<0.01），延長大鼠的首次排尿時間（P<0.05）；鹽炙后在4.5g·kg-1時就有顯著縮尿作用（P<0.01），鹽炙前后在18g·kg-1劑量時均能顯著降低水負荷大鼠6h排泄率（P<0.05）。對腎陽虛

5、多尿模型大鼠，益智仁石油醚部位在9g·kg-1劑量時能顯著降低其24h尿量（P<0.05），鹽炙前后無顯著差異。
　　2益智仁石油醚部位對腎陽虛多尿模型大鼠腎臟、脾臟、胸腺和睪丸指數(shù)的改變有顯著抑制作用（P<0.05～0.01），對模型大鼠腎臟和睪丸病理損傷有一定程度的改善，并且可以降低其血清BUN、Cr含量，增加外周血CD3+、CD3+CD4+相對量，降低CD3+CD8+相對量，對腎臟指數(shù)和病理改變的治療作用以鹽炙品為佳；益智仁

6、石油醚部位能顯著提高腎陽虛多尿模型大鼠血漿AVP和cAMP含量，上調AQP-2mRNA和AVPR-V2mRNA在腎髓質的表達，提高AQP-2和AVPR-V2蛋白的表達，且鹽炙后作用均明顯增強，輔料鹽起到協(xié)同增效作用。
　　3采用血清藥物化學方法和手段，分離鑒定出鹽益智仁石油醚部位的“入血成分”11，12-二羥基圓柚酮。鹽炙能加快機體對11，12-二羥基圓柚酮的吸收，增加其生物利用度。
　　結論：
　　益智仁溫腎縮尿作用

7、的物質基礎是石油醚部位，輔料鹽起到協(xié)同增效作用。該部位可通過改善腎臟病理損傷程度，緩和腎臟排泄功能障礙，提高機體免疫力而達到“溫腎”作用；能促進腎陽虛多尿模型大鼠分泌和釋放AVP，使機體合成cAMP量增加，從而使腎臟集合管AQP-2蛋白的表達量上升，對水的通透性增強達到“縮尿”作用。益智仁鹽炙后“溫腎縮尿”作用增強，可能與鹽炙能加快“入血成分”11，12-二羥基圓柚酮的吸收，增加其生物利用度有關。
　　創(chuàng)新點：
　　本文在中

8、醫(yī)藥理論指導下，運用現(xiàn)代科學技術和方法，開展益智仁鹽炙前后溫腎縮尿作用的研究，其創(chuàng)新性如下：
　　1從中醫(yī)整體觀出發(fā)，設計“溫腎”為本，“縮尿”為標的藥理指標，充分體現(xiàn)中醫(yī)“標本兼治”的用藥原則，為中藥及復方的研究提供一種思路。
　　2從AQP-2基因和蛋白水平進一步揭示了益智仁鹽炙“縮尿”作用機制。
　　3從體內過程角度闡明益智仁“生熟有別”，進一步完善了益智仁“鹽炙入腎”科學內涵。
　　4在小鼠飼養(yǎng)籠基礎上進