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1、背景:自1996年第11屆世界艾滋病大會(huì)上提出把高效抗反轉(zhuǎn)錄病毒治療(HAART)應(yīng)用于艾滋病(AIDS)的臨床治療以來,這一治療方法已被證明能夠行之有效地控制人類免疫缺陷病毒(HIV)感染的病程,提高艾滋病患者的生命質(zhì)量,為控制HIV的播散起到了很大的作用[1]。但是隨著抗病毒藥物的長(zhǎng)時(shí)間應(yīng)用,病毒的耐藥性逐漸出現(xiàn)。耐藥毒株的出現(xiàn)會(huì)導(dǎo)致治療的失敗,增加患者的病死率,對(duì)未來的抗病毒治療帶來了極大的考驗(yàn)[2.3]。
結(jié)核分枝桿菌
2、(MTB)感染是我國(guó)艾滋病患者最為常見的機(jī)會(huì)性感染之一,同時(shí)也是我國(guó)艾滋病患者死亡的重要原因[4]。HIV-1合并結(jié)核感染的患者在我國(guó)并不在少數(shù)。由于結(jié)核分枝桿菌與HIV有著相互作用[5],而抗結(jié)核藥物也會(huì)對(duì)抗病毒藥物產(chǎn)生影響,因此目前對(duì)于此類人群在先接受抗結(jié)核治療后何時(shí)開始抗病毒治療仍有爭(zhēng)論[6],而對(duì)于此類人群耐藥情況的研究則更為缺乏。本研究通過對(duì)未經(jīng)高效抗反轉(zhuǎn)錄病毒治療的HIV-1合并結(jié)核感染者進(jìn)行基因型耐藥檢測(cè),了解該類人群的耐
3、藥情況,進(jìn)而指導(dǎo)臨床治療的藥物選擇。
方法:研究使用的標(biāo)本來自上海市公共衛(wèi)生臨床中心感染科門診及感染一科病房所采集的入選患者的血漿。從血漿標(biāo)本中抽提得到病毒RNA,通過巢式聚合酶鏈反應(yīng)(Nested-PCR)擴(kuò)增HIV-1 pol基因區(qū),1%瓊脂糖電泳檢測(cè)目的片段后送測(cè)序。所得序列使用CLUSTAL X程序進(jìn)行序列排列比對(duì),檢索HIV Database得到HIV-1 pol基因區(qū)參考株序列,MEGA4.0程序生成系統(tǒng)進(jìn)化樹,初
4、步判定亞型,使用HIV BLAST軟件進(jìn)行亞型分析,通過提交美國(guó)斯坦福大學(xué)HIV耐藥數(shù)據(jù)庫(http://hivdb.stanford.edu)進(jìn)行在線分析耐藥突變位點(diǎn)以及對(duì)各類藥物的耐藥程度。
結(jié)果:32例擴(kuò)增陽性的Pol區(qū)基因中,B亞型共17例(53.1%),CRF01_AE亞型共12例(37.5%),CRF07_BC亞型共2例(6.3%),C亞型1例(3.1%)。有4例標(biāo)本對(duì)蛋白酶抑制劑(PIs)出現(xiàn)耐藥,突變位點(diǎn)為:1
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