Th17細胞在胃癌患者體內(nèi)的分布及其調(diào)節(jié)機制研究.pdf

1、目的:檢測胃癌患者Th17細胞分布，分析胃癌腫瘤微環(huán)境Th17細胞募集的機制，并探討Th17細胞促進胃癌進展的可能機制，為開展有效的胃癌免疫細胞治療提供實驗和理論依據(jù)。
　　 方法:
　　 1采用流式細胞分析技術(shù)，檢測胃癌患者外周血中Th17細胞占淋巴細胞比例，分析胃癌患者外周血Th17細胞的分布特征。
　　 2采用實時熒光定量RT-PCR法，檢測胃癌組織與非癌對照組織、胃癌腫瘤區(qū)域引流淋巴結(jié)與非腫瘤區(qū)域淋巴結(jié)中

2、IL-17和趨化因子(CCL1、CCL2、CCL7、CCL17、CCL20、CCL22、CXCL2、CXCL5、IL-8)的mRNA表達情況。
　　 3采用免疫組織化學(xué)染色法，檢測胃癌組織與非癌對照組織中血管內(nèi)皮特異性抗原CD34和中性粒細胞特異性抗原CD66b的表達。
　　 結(jié)果:
　　 1與健康對照組相比，胃癌患者外周血Th17細胞占淋巴細胞比例顯著升高（1.913±0.702％vs.0.402±0.022％

3、,P＜0.05）。
　　 2實時熒光定量RT-PCR結(jié)果顯示:與非癌對照組織相比，胃癌組織中IL-17和趨化因子CCL2、CCL7、CCL20、CCL22mRNA表達顯著增高(P＜0.05或P＜0.01);而趨化因子CCL17、CXCL2和CXCL5mRNA表達在兩者之間無明顯變化。與非腫瘤區(qū)域淋巴結(jié)相比，胃癌腫瘤區(qū)域引流淋巴結(jié)中IL-17和趨化因子CCL2、CCL7、CXCL5mRNA表達顯著增高(P＜0.05);而趨化因子C

4、CL17、CCL20、CCL22和CXCL2mRNA表達在兩者之間無明顯變化。
　　 3胃癌組織和腫瘤區(qū)域引流淋巴結(jié)中，IL-17mRNA表達與趨化因子mRNA表達相關(guān)性分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn):胃癌組織中IL-17mRNA表達水平與趨化因子CCL20、CCL22mRNA表達水平明顯相關(guān)(P＜0.05);而IL-17mRNA表達水平與趨化因子CCL2、CCL7mRNA表達水平無明顯相關(guān)性（P＞0.05）。腫瘤區(qū)域引流淋巴結(jié)中IL-17mR

5、NA表達水平與CCL2、CCL7mRNA表達水平無明顯相關(guān)性（P＞0.05）。
　　 4.胃癌組織IL-17mRNA表達與胃癌患者臨床病理參數(shù)之間的相關(guān)性分析顯示:胃癌組織IL-17mRNA表達水平與患者TNM分期相關(guān)(P＜0.05)，而與患者的性別、年齡、腫瘤分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤大小、血管浸潤無關(guān)(P＞0.05)。
　　 5.依據(jù)IL-17mRNA表達中位數(shù)，將胃癌組織標本分為兩組，IL-17高表達組與IL-17

6、低表達組，免疫組化結(jié)果顯示，IL-17高表達組CD34陽性細胞數(shù)量顯著高于IL-17低表達組。同樣，IL-17高表達組CD66b陽性細胞密度顯著高于IL-17低表達組。
　　 結(jié)論:
　　 1胃癌患者外周血和組織內(nèi)Th17細胞表達顯著增高，胃癌組織微環(huán)境中Th17細胞聚集可能與趨化因子CCL20、CCL22表達升高，誘導(dǎo)Th17細胞由外周向腫瘤組織募集有關(guān)。
　　 2胃癌組織Th17細胞聚集，并通過誘導(dǎo)新生血管生