MicroRNA-30c及其靶基因MTA-1在子宮內膜癌中的作用研究.pdf

1、目的
　　子宮內膜癌發(fā)病率近年呈現(xiàn)上升趨勢，嚴重影響女性生命健康。目前有研究顯示microRNA(miRNA)表達的失調與子宮內膜癌的發(fā)生發(fā)展密切相關。我們的前期研究已經證實microRNA-30c(miR-30c)在子宮內膜癌中以腫瘤轉移相關基因-1(MTA-1)為靶基因，參與子宮內膜癌細胞株增殖及侵襲能力的調節(jié)。本研究旨在深入探究子宮內膜癌中miR-30c的抑癌作用及其與靶基因MTA-1間的關系，并進一步探討雌激素對兩者表達的

2、調控作用，為miR-30c成為提示子宮內膜癌預后相關分子標志物及治療靶點奠定基礎。
　　方法
　　收集南京鼓樓醫(yī)院子宮內膜癌手術病人的腫瘤組織（21例）及因非惡性因素行子宮切除術患者的正常內膜組織（14例），Realtime-PCR技術測定miR-30c在不同內膜組織中以及不同子宮內膜癌細胞株中的表達情況。體外培養(yǎng)子宮內膜癌Ishikawa細胞株利用LipfectamineTM2000分別介導miR-30c的mimics(m

3、iR-mi)、inhibitor(miR-in)及MTA-1siRNA(si-MTA-1)轉染入Ishikawa細胞，并分別以各自的以無義隨機序列scramble作為陰性對照，Realtime-PCR技術檢測miR-30c及MTA-1表達水平的變化;Westernblot技術檢測MTA-1蛋白質表達的變化;并應用MTT比色法檢測細胞增殖能力，人工重組基底膜侵襲小室(Transwell)檢測細胞侵襲能力。雌激素作用于Ishikawa及HE

4、C-1-B細胞后Realtime-PCR技術檢測miR-30c及MTA-1表達水平的變化。
　　結果
　　1、miR-30c在腫瘤組織中低表達于正常內膜組織，在ER陽性的Ishikawa細胞中低表達于ER陰性的HEC-1-B細胞，而MTA-1在不同細胞株中的表達與miR-30c負相關。
　　2、上調及下調miR-30c表達，分別降低及增加了MTA-1蛋白的表達，并且MTA-1表達的降低可以負反饋調節(jié)miR-30c，使得

5、其表達上調。
　　3、上調miR-30c可以抑制子宮內膜癌細胞株的增殖、遷移及侵襲能力，并通過共轉染實驗證實miR-30c通過直接作用于MTA-1起調控作用。
　　4、雌激素通過不同的方式作用于Ishikawa及HEC-1-B細胞株分別下調miR-30c表達及上調MTA-1的表達。
　　結論
　　本研究證實miR-30c在子宮內膜癌組織中低表達，并且通過直接調控MTA-1表達而起到抑癌作用。另外，雌激素是miR-