附子不同煎煮時(shí)間炮制品毒-量-效關(guān)系研究.pdf

1、目的：揭示不同煎煮時(shí)間，附子毒-效-量之間的關(guān)系。
　　 方法：本論文分為附子生品和各炮制品的總生物堿含量測(cè)定、附子生品與不同炮制品的指紋圖譜研究和附子生品與不同炮制品的毒性、藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)三部分。
　　 第一部分應(yīng)用酸堿滴定的方法測(cè)定不同煎煮時(shí)間炮制品及附子生品中總生物堿的含量；第二部分采用腫LC-UV法對(duì)附子生品及不同煎煮時(shí)間炮制品的指紋圖譜進(jìn)行了研究；第三部分進(jìn)行附子生品及不同煎煮時(shí)間炮制品的急性毒性試驗(yàn)和同一給藥劑量

2、下附子生品及不同煎煮時(shí)間炮制品的鎮(zhèn)痛、抗炎、耐缺氧等藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)。
　　 通過(guò)三部分實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)合起來(lái)，探討、分析附子不同煎煮時(shí)間炮制品之間關(guān)系，以確定最佳的炮制時(shí)間和安全給藥劑量。
　　 結(jié)果：
　　 1、附子生品和不同煎煮時(shí)間炮制品中總生物堿的含量集中在0.6％～.8％之間。用酸堿滴定測(cè)定附子中總生物堿含量這種方法可靠、準(zhǔn)確。
　　 2、用HPLC進(jìn)行測(cè)定，色譜條件為：Kromisil ODS柱(4.6

3、mm×250 mm，5μmn)；流動(dòng)相中乙睛-40 mmoⅥ乙酸銨(氨水調(diào)pH10.0)梯度洗脫；檢測(cè)波長(zhǎng)為240 nm；流速1 ml/min；柱溫30℃；進(jìn)樣量10μl。附子生品及不同煎煮時(shí)間炮制品的指紋圖譜研究，發(fā)現(xiàn)共有峰6個(gè)，且譜圖之間有較好的相似度；非共有峰也有，但是峰面積較小。各峰之間的分離度較好，能夠準(zhǔn)確的表現(xiàn)附子生品和不同煎煮時(shí)間炮制品之間的異同。通過(guò)精密度實(shí)驗(yàn)、穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)及重復(fù)性實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)該法穩(wěn)定、準(zhǔn)確可行。
　　

4、 3、附子生品及不同煎煮時(shí)間炮制品的急性毒性試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，生品的毒性很大，其他不同煎煮時(shí)間炮制品的毒性隨煎煮時(shí)間的增加，毒性降低，煎煮105min以上各組毒性已很小，是人常用量的300倍以上，屬安全范圍。附子生品的LD50為4.85g/kg，煎煮15min組的LD50為29.93g/kg，煎煮30min組LD50為57.60g/kg，煎煮60min組LD50為77.96g/kg，煎煮105min組及更長(zhǎng)時(shí)間組的給藥100g/kg時(shí)無(wú)死亡，1

5、05min組有中毒現(xiàn)象，其余各組且小鼠精神、活動(dòng)正常，此劑量相當(dāng)于人用量的300倍以上。
　　 附子藥效學(xué)試驗(yàn)，樣品組各給藥劑量相等(都在安全劑量范圍之內(nèi))。①醋酸扭體鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)結(jié)果，附子生品組和陽(yáng)性對(duì)照組藥效最高，和對(duì)照組之間存在極顯著差異(p＜0.001)，105nmin組和240min組與對(duì)照組比較，無(wú)顯著性差異，15min組和對(duì)照組之間存在顯著差異(p＜0.01)，其余各組與對(duì)照組之間也存在顯著性差異(p＜0.05)。結(jié)論

6、：隨煎煮時(shí)間增加，附子鎮(zhèn)痛活性降低。②二甲苯引起小鼠耳腫脹試驗(yàn)結(jié)果，附子生品及各樣品組與對(duì)照組比較均有抗炎活性(都存在顯著性差異)。從腫脹率數(shù)值分析，陽(yáng)性對(duì)照組的抗炎活性很強(qiáng)(p＜0.001)，而樣品組抗炎活性最強(qiáng)的是60min組，和對(duì)照組之間存在極顯著差異(p＜0.001)，其他各組除30min組((p＜0.05))之外，和對(duì)照組比較都有顯著性差異(p＜0.001)。結(jié)論：附子生品及不同煎煮時(shí)間炮制品的抗炎活性以60min組和380m

7、in組最強(qiáng)，但是抗炎作用和阿司匹林還有一定的差距。③常壓耐缺氧試驗(yàn)結(jié)果，附子生品及各樣品組與對(duì)照組比較均有耐缺氧活性(都存在顯著性差異)，都能延長(zhǎng)小鼠的存活時(shí)間。樣品組耐缺氧活性最強(qiáng)的是60min組，和對(duì)照組之間存在極顯著差異(p＜0.001)。結(jié)論：附子生品及不同煎煮時(shí)間炮制品的均具有耐缺氧活性，可以延長(zhǎng)小鼠的存活時(shí)間，其活性以60min組最強(qiáng)。
　　 結(jié)論：1、附子通過(guò)煎煮其毒性降低，但是炮制品中總生物堿的含量變化不大。2、