昆布多糖硫酸酯的半合成及其對(duì)前列腺癌細(xì)胞PC-3的作用機(jī)制研究.pdf

1、本課題主要是對(duì)昆布多糖(Lanunarin)的修飾產(chǎn)物昆布多糖硫酸酯(LAMS)的性質(zhì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析，并對(duì)其在前列腺癌細(xì)胞中的作用進(jìn)行研究。
　　 昆布多糖經(jīng)硫酸酯化后，構(gòu)象發(fā)生了改變，生成的昆布多糖硫酸酯(LAMS)具有多種生物活性，能有效抑制腫瘤細(xì)胞增殖。利用氯磺酸-吡啶法對(duì)昆布多糖進(jìn)行硫酸酯化修飾，所得產(chǎn)物L(fēng)AMS的純度為96％，其分子量為16315Da，SO42-含量為41.30％；紫外、紅外光譜分析結(jié)果均顯示硫酸酯化多糖

2、的光譜特征，13C-NMR譜顯示多糖的2位羥基為SO42-的主要取代位置。
　　 本實(shí)驗(yàn)以體外培養(yǎng)的非激素依賴型人前列腺癌細(xì)胞株P(guān)C-3經(jīng)LAMS處理，以WST-8、流式細(xì)胞術(shù)(FCM)及Annexin V-FITC/PI雙染色法觀察細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期及早期凋亡率；以RT-PCR及Western Blot檢測(cè)PC-3細(xì)胞增殖、凋亡相關(guān)基因PTEN、P27kipl、Caspase-3、BCL-2 mRNA和蛋白的表達(dá)，探討LAMS

3、對(duì)前列腺癌細(xì)胞的作用及可能的作用機(jī)制。
　　 結(jié)果表明，隨著LAMS濃度的增加和作用時(shí)間的延長(zhǎng)，對(duì)PC-3細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率逐漸增高，呈時(shí)間.劑量效應(yīng)。50μg/mL的LAMS對(duì)PC-3細(xì)胞增殖無(wú)明顯的抑制作用，100μg/mL和200μg/mL的LAMS對(duì)PC-3細(xì)胞增殖有明顯的抑制作用。流式細(xì)胞儀分析顯示，隨著LAMS濃度的增加，PC-3細(xì)胞凋亡率逐漸增高；熒光顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)，隨著LAMS濃度的增加，PC-3細(xì)胞凋亡小體逐漸增