液壓損傷后大鼠損傷鄰近及遠隔區(qū)域缺血性損害的觀察.pdf

1、目的:
　　 本課題利用大鼠液壓損傷腦外傷模型，觀察大鼠腦損傷后損傷鄰近及遠隔區(qū)域腦缺血的動態(tài)變化，為腦損傷后腦缺血性損害的研究提供基礎(chǔ)實驗依據(jù)。
　　 方法：
　　 健康雄性Sprague Dawley(SD)大鼠36只，體重范圍200～300g在SPF級動物室飼養(yǎng)一周后隨機分為6組。正常對照組和假手術(shù)組（僅行顱骨鉆孔，無外傷打擊）和液壓腦損傷后12h、72h、1w、2w組。每組6只。以改良的大腦中動脈定向側(cè)位

2、液壓沖擊法建立大鼠腦外傷模型，取各時間點大鼠顱腦損傷鄰近及遠隔區(qū)域腦組織，檢測乳酸、缺氧誘導(dǎo)因子(HIF-1α)及Bax表達的變化、采用TUNEL染色法分析神經(jīng)元細胞凋亡，反映腦缺血及神經(jīng)元細胞凋亡的動態(tài)變化。
　　 結(jié)果：
　　 1、 損傷臨近區(qū)域，模型組12h組乳酸含量開始增多，72h組乳酸含量達到高峰，1w組乳酸含量下降至2w時恢復(fù)正常。大鼠腦外傷12h后即有Bax表達，72h后表達逐漸增加，1w后表達達到高峰，與

3、正常對照組及假手術(shù)組相比，有明顯的差異(p<0.01)，2w后基本恢復(fù)正常。大鼠腦外傷12h后即有HIF-1α表達，72h后表達顯著增加與正常對照組及假手術(shù)組相比，有明顯的差異(p<0.01)，1w后表達迅速下降，表達量低于12h組，2w后基本恢復(fù)正常。大鼠腦外傷12h后即檢測到神經(jīng)元細胞凋亡，72h后表達增加與正常對照組及假手術(shù)組相比，有明顯的差異，1w后表繼續(xù)增加，2w后達到高峰。各個亞組與正常對照組及假手術(shù)組比較均有統(tǒng)計學(xué)意義(p

4、<0.01)。
　　 2、 損傷遠隔區(qū)域，模型組12h組乳酸含量開始增多，72h組乳酸含量達到高峰，1w組乳酸含量下降至2w時恢復(fù)正常。大鼠腦外傷12h后即有Bax表達，72h后表達逐漸增加，1w后表達達到高峰，2w后基本恢復(fù)正常。大鼠腦外傷12h后即有HIF-α表達，72h后表達顯著增加與正常對照組相比，有明顯的差異(p<0.01)，1w后表達迅速下降，表達量低于12h組，2w后基本恢復(fù)正常。大鼠腦外傷12h后即檢測到神經(jīng)元細

5、胞凋亡，72h后表達增加與正常對照組及假手術(shù)組相比，有明顯的差異，1w后表達繼續(xù)增加，2w后達到高峰。各個亞組與正常對照組及假手術(shù)組比較均有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01)。
　　 結(jié)論：
　　 1、 大鼠液壓沖擊腦損傷模型致傷能量測定方便快捷，具有良好的穩(wěn)定性和可重復(fù)性，能夠較好的再現(xiàn)臨床閉合性顱腦損傷，可以很好的模擬實際腦外傷，同時還具有價格相對低廉、操作簡單易學(xué)等特點，方便大批制作模型，可以較好的應(yīng)用于實驗研究。

6、　　 2、 損傷臨近及遠隔區(qū)域存在缺血缺氧的變化，其變化規(guī)律與損傷區(qū)域缺血缺氧的變化規(guī)律基本一致。乳酸、HIF是判斷缺血缺氧的敏感性指標?？梢愿鶕?jù)兩者含量的變化評估腦損傷的程度及病情發(fā)展變化。兩者與腦外傷后腦水腫高峰期相吻合，提示乳酸、HIF可能促進了腦水腫的發(fā)展。
　　 3、 通過TUNEL凋亡試劑盒對各個時間點損傷臨近及遠隔區(qū)域的組織切片進行檢測發(fā)現(xiàn)有凋亡細胞的陽性表達，提示Bax蛋白表達可以調(diào)節(jié)細胞凋亡，其表達與細胞凋亡

7、可能有直接的因果關(guān)系。但是兩者表達的高峰期不具有一致性。提示Bax與細胞凋亡可能有直接非同步的因果關(guān)系。
　　 4、 本實驗通過TUNEL法，檢測發(fā)現(xiàn)顱腦液壓損傷后不同時間點損傷臨近區(qū)域及遠隔區(qū)域存在凋亡陽性細胞，提示腦外傷后由于損傷臨近區(qū)域及遠隔區(qū)域存在細胞凋亡，可能會引起損傷區(qū)域和損傷周圍區(qū)域的腦組織發(fā)生萎縮。
　　 5、 實驗中還發(fā)現(xiàn)，損傷臨近區(qū)域凋亡陽性細胞數(shù)明顯高于損傷遠隔區(qū)域，越靠近損傷區(qū)域，細胞凋亡越明顯，