燈盞花素和二氫楊梅素對高糖誘導的人臍靜脈內皮細胞氧化應激和NO水平的影響.pdf

1、研究目的：探討燈盞花素和二氫楊梅素對高糖誘導的人臍靜脈內皮細胞氧化應激的影響，初步探討其作用機制，并進一步觀察燈盞花素和二氫楊梅素對高糖環(huán)境NO水平的影響。 研究方法： CCK-8法檢測燈盞花素和二氫楊梅素對HUVEC活性的影響；利用熒光探針DCFH-DA標記HUVEC內ROS并結合激光共聚焦顯微鏡技術測定熒光強度；用硝酸還原酶法測細胞上清液中NO3-+NO2-含量來反映NO水平；用MESACUP@蛋白激酶試劑盒檢測HU

2、VEC胞漿和胞膜的PKC活性。 研究結果： 1.不同濃度的燈盞花素或二氫楊梅素(10-9、10-7、10-5M)分別處理HUVEC48小時及72小時，與正常細胞相比，存活率無顯著性差異。 2.高糖組細胞ROS較正常對照組相比增高，而甘露醇對照組與正常對照組相比無顯著性差異。燈盞花素或二氫楊梅素對照組與正常對照組相比均無顯著性差異。與高糖組比，濃度為10-9、10-7、10-5M的燈盞花素或二氫楊梅素干預組細胞RO

3、S均降低，與正常對照組相比無顯著性差異，且三個不同濃度藥物干預組之間均無顯著性差異。 3.100nM PMA處理正常對照組細胞1.5h后，ROS較正常對照組增高，而燈盞花素或二氫楊梅素均可以完全抑制這種現(xiàn)象，100nM PMA處理燈盞花素或二氫楊梅素干預組細胞1.5h后，ROS水平與正常對照組相比無顯著性差異。與高糖組相比，100nM PMA處理高糖組細胞1.5h后刺激ROS增加，而燈盞花素或二氫楊梅素不僅能完全抑制這種現(xiàn)象，還

4、能降低ROS至正常對照組水平。 4.與正常對照組細胞相比較，高糖處理組細胞胞漿PKC活性(PKCc)增高，胞膜PKC活性(PKCm)明顯增高，且胞膜活性占總活性百分比(PKCm/PKCt)升高。與高糖組比，10-9M燈盞花素干預組PKCc、PKCm、PKCm/PKCt均降低。而10-9M二氫楊梅素干預組細胞的PKCc、PKCm及PKCm/PKCt與高糖組比較均無顯著性差異。 5.與正常對照組比較，高糖作用HuVEC48h

5、后，NO水平顯著降低。10-9M燈盞花素對照組和10-9M二氫楊梅素對照組細胞NO水平與正常對照組相比無顯著性差異。10-9M燈盞花素干預組的NO水平較高糖組顯著升高，而10-9M二氫楊梅素干預組細胞的NO水平較高糖組略有升高，但與高糖組相比無顯著性差異。 研究結論： 1.燈盞花素和二氫楊梅素對人臍靜脈內皮細胞的活性均無明顯影響。 2.燈盞花素和二氫楊梅素均可降低高糖誘導的人臍靜脈內皮細胞氧化應激。 3.