羅漢果甜苷的分離、分析及其在卷煙中的應(yīng)用研究.pdf

1、本文從天然藥物原料－羅漢果中分離、純化了其中主要藥物功能成分-羅漢果甜苷。通過(guò)反相高效液相色譜（RP-HPLC）定量分析了羅漢果甜苷V在所提純總苷中的含量；將提純的羅漢果甜苷加到卷煙后，經(jīng)吸煙機(jī)對(duì)煙氣捕集、利用RP－HPLC分析主流煙氣粒相物中羅漢果甜苷V的含量，并與對(duì)照煙樣對(duì)比分析，確定了主流煙氣粒相物中的藥物功能成分-羅漢果甜苷V的轉(zhuǎn)移率；通過(guò)熱裂解試驗(yàn)，用GC-MS定性分析了羅漢果甜苷在高溫下的成分；將分離提純的產(chǎn)品應(yīng)用于卷煙中，

2、通過(guò)評(píng)吸確定了羅漢果總苷的最佳用量和作用效果。 具體工作內(nèi)容包括： 1．羅漢果甜苷的萃取和純化 以羅漢果為起始原料，用65％乙醇提取羅漢果總苷，將粗制的總苷過(guò)D-280強(qiáng)堿性陰離子樹(shù)脂對(duì)其脫色，以AB-8大孔吸附樹(shù)脂對(duì)其中的總苷進(jìn)行吸附收集，確定的工藝條件為：粗制羅漢果總苷脫色時(shí)，脫色溶液的pH值以10，濃度以8－10mg/ml為適宜； AB-8樹(shù)脂的堆積密度是0.98g/ml，AB-8樹(shù)脂對(duì)羅漢果總苷的飽和吸

3、附量是19.8mg/ml；優(yōu)選的洗脫條件為依次用蒸餾水清洗堿和無(wú)機(jī)鹽等雜質(zhì)，最后以50％乙醇收集洗脫液。甜苷收率為42％（以羅漢果計(jì)）。 2．定量分析了羅漢果甜苷V在所提純總苷中的含量 采用RP－HPLC法分析羅漢果甜苷V，具體分析條件為：柱型：Waters ODS C18柱(十八烷基硅烷) (250x4.6mm 5um，美國(guó)waters科學(xué)儀器公司)；流動(dòng)相：乙腈：水=23：77（V/V）；流速：1.0ml/min；

4、柱溫：30℃.。線性回歸方程：Y＝141374.82171×X－20775.65968，線性相關(guān)系數(shù)是0.9993。對(duì)該方程的線性范圍進(jìn)行考察，結(jié)果表明羅漢果甜苷的進(jìn)樣量在0.025ug－30ug時(shí)均有良好的線性關(guān)系。該方法的最低檢出限是25ng。實(shí)驗(yàn)測(cè)得所分離的羅漢果總苷的純度是67％。 3.從甜苷中單離了羅漢果甜苷V 把脫色、吸附后的羅漢果總苷過(guò)柱層析分離單體，以氯仿：甲醇：水為6：4：1為洗脫液，薄層色譜檢驗(yàn)洗脫

5、液、通過(guò)反復(fù)柱層析富集Rf相同的單一組分。并通過(guò)紅外光譜和高效液相色譜對(duì)所分離和提純的羅漢果總苷、羅漢果甜苷V進(jìn)行了定性、定量分析。所提純的羅漢果甜苷V的純度是92％。 4．定量測(cè)定了羅漢果甜苷V的轉(zhuǎn)移率和截留率 將羅漢果甜苷加入到“金許昌”卷煙后經(jīng)吸煙機(jī)抽吸，以濾嘴和劍橋?yàn)V片捕集主流煙氣粒相物，對(duì)所捕集得到的煙氣進(jìn)行適當(dāng)處理后，在前面建立的反相高效液相色譜法分析羅漢果甜苷V的基礎(chǔ)上定量分析主流煙氣中羅漢果甜苷V的轉(zhuǎn)移率

6、、及濾嘴中羅漢果甜苷V的截留率。結(jié)果分別是15.0％和7.6％，該方法的重現(xiàn)性較好。 5．初步研究了羅漢果甜苷的高溫裂解產(chǎn)物 通過(guò)熱裂解GC－MS技術(shù)定性分析羅漢果總苷的熱裂解成分。實(shí)驗(yàn)圖譜及資料證明羅漢果總苷裂解時(shí)，隨著裂解溫度的升高，裂解產(chǎn)物的數(shù)量變大，成分變復(fù)雜。可以推斷羅漢果甜苷不會(huì)在高溫下分解出有害物質(zhì)稠環(huán)芳烴如苯并[a]芘等。 6．研究了最終產(chǎn)品在卷煙中的應(yīng)用 按不同比例所分離的羅漢果總苷添加