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文檔簡介
1、目的:通過制造骨質(zhì)疏松模型觀察關(guān)節(jié)軟骨的變化,探討關(guān)節(jié)軟骨下骨質(zhì)疏松對關(guān)節(jié)軟骨退變的影響。 方法:采用三月齡雌性Wistar大鼠120只,按體重隨機(jī)分為對照組1(去勢對照組)、去勢組、對照組2(維甲酸對照組)、維甲酸組,每組各30只,去勢模型的建立:采用切除大鼠雙側(cè)卵巢的方法建立去勢大鼠動物模型。對照組1大鼠按去勢組方法不切除卵巢,直接關(guān)閉切口。維甲酸組模型的建立:按75mg/(kg·d)維甲酸連續(xù)灌喂15天,每天一次。對照組2
2、用等量的蒸餾水灌胃15天。處死時間、取材與測量指標(biāo):分別于試驗開始后的4周、8周、12周時每組取10只大鼠處死,處死前測量大鼠的體重,股動脈放血處死。取完整膝關(guān)節(jié)(包括股骨段、脛骨段各3cm),測量其骨密度,然后用10%EDTA脫鈣后石蠟包埋制片分別進(jìn)行HE染色、甲苯胺藍(lán)染色、番紅O染色,0.8cm),顯微鏡下觀察軟骨下骨質(zhì)改變及關(guān)節(jié)軟骨的形態(tài)學(xué)改變,并對關(guān)節(jié)軟骨形態(tài)進(jìn)行病理學(xué)肉眼觀察評分,采用病理圖像分析系統(tǒng)對關(guān)節(jié)軟骨厚度進(jìn)行測量。對
3、去勢組和維甲酸組分別做軟骨下骨BMD值和軟骨厚度的線性相關(guān)圖,觀察兩者之間的關(guān)系。全部計量資料均以SPSS10.0統(tǒng)計軟件包進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。 結(jié)果:120只大鼠除維甲酸組在第8周和第12周各死亡1只外,其余均成功完成實驗。實驗第4周各實驗組無論是軟骨下骨質(zhì)還是關(guān)節(jié)軟骨均與對照組差別不大,到實驗第8周,去勢組和維甲酸組脛骨軟骨下BMD明顯高于對照組(p<0.01),維甲酸組與去勢組相比也有統(tǒng)計學(xué)意義。軟骨下骨小梁變細(xì)數(shù),數(shù)目減少,
4、連續(xù)性降低,骨小梁板分布離散。第12周,去勢組和維甲酸組軟骨下BMD與對照組相比進(jìn)一步降低(p<0.05),軟骨下骨小梁變的更為稀疏,數(shù)目進(jìn)一步減少,失去連續(xù)性,維甲酸組軟骨下骨小梁甚至成棒狀或點狀排列。4周時各實驗組在關(guān)節(jié)軟骨的厚度和形態(tài)學(xué)改變上沒有太大差別。8周時去勢組和維甲酸組與對照組相比,軟骨厚度變薄(p<0.01),細(xì)胞排列紊亂,層次不清,細(xì)胞成團(tuán)狀、巢壯聚集。與去勢組相比,維甲酸組關(guān)節(jié)軟骨變化更明顯。第12周,軟骨厚度進(jìn)一步
5、變薄(p<0.01),細(xì)胞排列更加紊亂,軟骨層表面變得凹凸不平,軟骨表面有小裂隙形成,維甲酸組軟骨層內(nèi)甚至有小囊沖形成。8周和12周時去勢組和維甲酸組與各自對照組脛骨關(guān)節(jié)軟骨病理學(xué)肉眼評分結(jié)果顯示差異顯著(p<0.05),12周時去勢組與維甲酸組病理學(xué)肉眼評分結(jié)果也有明顯差異(p<0.01)。分別把去勢組和維甲酸組軟骨下骨BMD值與脛骨關(guān)節(jié)軟骨厚度作線性相關(guān),可見在兩組中軟骨下骨BMD值與關(guān)節(jié)軟骨厚度成正相關(guān),即隨軟骨下骨BMD值的減小
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