蛹蟲草固體培養(yǎng)基中蟲草多糖、蟲草素提取分離工藝研究.pdf

1、固體培養(yǎng)方式目前已被廣泛用于蛹蟲草的培養(yǎng),蛹蟲草固體培養(yǎng)基中富含菌絲,但因沒有成熟的工藝對其中的有效成份進(jìn)行提取分離,目前在培養(yǎng)結(jié)束后固體培養(yǎng)基都被作為廢物棄掉,不僅造成資源的浪費(fèi),對環(huán)境也造成一定的影響.隨著蛹蟲草培養(yǎng)產(chǎn)業(yè)規(guī)模的不斷擴(kuò)大,對蛹蟲草固體培養(yǎng)基如何加工、利用已成為一個迫切需要解決的問題. 本文根據(jù)蛹蟲草固體培養(yǎng)基有效成份的理化性質(zhì),以蛹蟲草固體培養(yǎng)基為原料,對影響有效成份提取的工藝條件進(jìn)行了研究,通過對提取溫度、提

2、取次數(shù)、提取時間、料液比應(yīng)用正交實驗設(shè)計,最終確定用水80℃提取三次,120min/次,料液比為1:15的工藝條件為蟲草多糖最佳提取工藝條件,并分別采用Sevage法、改良的Sevage法和澄清劑法去除蟲草多糖粗品中蛋白,以及DEAE纖維素和葡聚糖凝膠柱層析對蟲草多糖進(jìn)行分離純化.通過對溶劑濃度、提取次數(shù)、提取時間、料液比進(jìn)行正交實驗設(shè)計,最終確定用75﹪乙醇超聲波提取三次,40min/次,料液比為1:20的工藝條件為蟲草素最佳提取工藝

3、條件,并分別采用陰、陽離子交換樹脂柱層析和硅膠柱層析對蟲草素進(jìn)行分離純化.通過采用苯酚一硫酸法和HPLC對提取出的蟲草多糖和蟲草素進(jìn)行含量測定,確定了不同純化方法之間的差異. 對蟲草多糖和蟲草素提取的工藝條件和路線進(jìn)行分析,結(jié)合生產(chǎn)實際,在小試確定的提取、純化方法基礎(chǔ)上進(jìn)行以蛹蟲草固體培養(yǎng)基為原料提取蟲草多糖和蟲草素的放大實驗,確定了綜合提取的工藝條件和路線,即采用熱水回流提取法進(jìn)行初提,用醇沉法分離蟲草多糖并以Sevage法除