肌聯素對豬肌內脂肪細胞分化及脂肪酸利用的調控研究.pdf

1、本研究通過分離培養(yǎng)豬骨骼肌衛(wèi)星細胞和肌內前體脂肪細胞，利用骨骼肌細胞和肌內脂肪細胞間接共培養(yǎng)、重組肌聯素處理肌內脂肪細胞等技術手段，研究肌肉細胞對肌內脂肪細胞分化，肌聯素對肌內脂肪細胞分化、脂肪細胞中脂肪酸攝取、轉運和利用的影響。試驗獲得以下結果:
　　1.為了研究豬骨骼肌細胞對肌內前體脂肪細胞分化的影響，利用豬骨骼肌衛(wèi)星細胞和肌內前體脂肪細胞共培養(yǎng)，分別誘導分化，檢測肌內脂肪細胞分化水平、脂肪細胞分化標志基因的表達以及脂代謝關鍵

2、酶的表達。結果表明:與肌內脂肪細胞單獨培養(yǎng)相比，共培養(yǎng)體系中1）肌內脂肪細胞脂滴數量和脂滴面積顯著減少(P＜0.05);2)肌內脂肪細胞增殖分化標志基因PPARγ和C/EBPα的表達量極顯著下降(P＜0.01);3）肌內脂肪細胞ACC、FAS的表達水平極顯著下降（P＜0.01）;4）骨骼肌細胞內肌聯素的基因表達水平隨時間而極顯著地增加。
　　2.為了研究重組肌聯素對肌內脂肪細胞利用外源游離脂肪酸的調控作用，試驗采用重組肌聯素和脂肪

3、酸單獨或共同處理豬肌內脂肪細胞，研究肌聯素對肌內脂肪細胞分化、肌內脂肪細胞攝入外周游離脂肪酸的能力、脂質合成與分解代謝以及脂肪細胞線粒體脂肪酸氧化的影響，檢測肌內脂肪細胞培養(yǎng)基中游離脂肪酸的含量、肌內脂肪細胞脂肪酸轉運相關基因和蛋白的表達及其作用的信號通路。結果表明:1）肌聯素單獨作用能極顯著降低肌內脂肪細胞的脂滴數量和脂滴面積(P＜0.01)，并極顯著地促進對游離脂肪酸的吸收(P＜0.01);2)肌聯素單獨處理或與棕櫚酸共同處理，能顯

4、著提高肌內脂肪細胞中脂肪酸轉運相關因子FATP1、FABP4的表達水平(P＜0.05);3）肌聯素單獨處理或與棕櫚酸共同處理后顯著提高肌內脂肪細胞HSL、LPL的表達量(P＜0.05);
　　4)肌聯素通過激活p38MAPK信號通路調節(jié)脂肪酸轉運和脂代謝。
　　3.為了研究重組肌聯素對豬肌內脂肪細胞中脂肪酸氧化的影響，試驗采用重組肌聯素處理豬肌內脂肪細胞，檢測線粒體中與脂肪酸氧化相關的標志因子和蛋白的表達。結果表明:1）肌聯