苦參堿調控RhoA-ROCK信號通路抑制異丙腎上腺素致大鼠心肌肥厚作用及分子機制研究.pdf

1、目的：探討苦參堿對異丙腎上腺素(isoproterenol，ISO)致大鼠心肌肥厚抑制作用，其分子機制是否與調控RhoA/ROCK信號通路有關。
　　方法：皮下注射ISO（85mg·kg-1）建立大鼠急性代償性心肌肥厚模型，將大鼠隨機分為對照組、ISO模型組、苦參堿（50、100和200mg·kg-1）+ISO組、普萘洛爾（10mg·kg-1）+ISO組和單用苦參堿組（200mg·kg-1）。計算左心室肥厚指數(shù)；HE染色觀察心肌組

2、織病理學結構變化。ELISA檢測血清中ADMA、NO、cTnI、 bFGF、IGF-1和TGF-β1的水平；Western blot方法檢測左心室組織 eNOS和ROCK信號通路相關蛋白的表達；RT-PCR方法檢測左心室組織IGF-1、bFGF、TGF-β1、Ⅰ和Ⅲ型膠原、纖維連接蛋白等mRNA的表達。
　　結果：
　　各組之間大鼠HM/BW和心臟左心室比（LVM/HM）沒有顯著變化（P＞0.05）。ISO組大鼠LV dP/

3、dtmax和LV dP/dtmin顯著降低；苦參堿（50mg·kg-1）組LV dP/dtmax和LV dP/dtmin顯著增加。組織病理學檢查結果顯示，陽性對照組和苦參堿（50、100和200mg·kg-1）可減輕大鼠心肌細胞肥厚、炎性細胞浸潤等ISO致急性心肌組織病理學結構的改變。ISO組大鼠血清中CnT-I的含量顯著升高；而陽性對照組和苦參堿（50、100和200mg·kg-1）能明顯抑制ISO致心肌肥厚大鼠血清中CnT-I含量的

4、升高；模型組大鼠心肌組織內col1a1 mRNA表達明顯增加；苦參堿（50、100和200 mg·kg-1）給藥后心肌組織內col1a1mRNA的表達顯著降低。ELISA檢測結果顯示：ISO組大鼠血清中NO、IGF-1和TGF-β1的含量顯著降低；而陽性對照組中普耐諾爾和苦參堿（50、100和200mg·kg-1）能明顯抑制ISO致心肌肥厚大鼠血清中NO、IGF-1和TGF-β1含量的降低；ISO組大鼠血清中ADMA的含量顯著升高；bF

5、GF的含量在各組之間沒有顯著性變化。Western blot檢測結果顯示：ISO組大鼠心肌組織內eNOS和phospho-eNOS(Ser1177)表達顯著減少，而RhoA和ROCK1表達顯著升高?？鄥A（100和200 mg·kg-1）給藥后心肌組織內eNOS和phospho-eNOS(Ser1177)的表達顯著升高，RhoA和ROCK1的表達顯著降低?？鄥A(50 mg·kg-1)給藥后對心肌p-eNOS(Ser1177)、eNOS

6、、RhoA、ROCK1表達無顯著影響；苦參堿（200 mg·kg-1）單用對大鼠心肌組織p-eNOS(Ser1177)，eNOS和RhoA和ROCK1表達無影響。普萘洛爾（10mg·kg-1）組心肌組織內 eNOS和phospho-eNOS(Ser1177)的表達顯著升高，RhoA和ROCK1的表達顯著降低。RT-PCR檢測結果顯示：ISO組大鼠心肌組織內IGF-1、TGF-β1和bFGF mRNA表達顯著降低；苦參堿（50、100和2