懷菊花降壓有效部位提取純化及質(zhì)量評(píng)價(jià)研究.pdf

1、目的：懷菊花是菊科植物菊(Chrysanthemum morifolium Ramat.)的干燥頭狀花序，具有散風(fēng)清熱、平肝明目之功效，為河南道地藥材四大懷藥之一，栽培歷史悠久，臨床應(yīng)用廣泛。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察對(duì)自發(fā)性高血壓模型大鼠血壓的影響，篩選懷菊花中降壓有效部位；優(yōu)選該降壓有效部位最佳提取純化工藝條件；優(yōu)選該降壓有效部位薄層色譜條件，進(jìn)行薄層色譜研究；優(yōu)選該降壓有效部位高效液相色譜條件并進(jìn)行方法學(xué)考察，進(jìn)行含量測(cè)定研究；對(duì)懷菊花中降壓

2、有效部位進(jìn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。
　　方法：在實(shí)驗(yàn)中，對(duì)懷菊花降壓有效部位的提取溶劑進(jìn)行了考察，確定了最佳提取溶劑。通過(guò)正交試驗(yàn)考察了乙醇濃度、乙醇用量、提取時(shí)間、提取次數(shù)等提取條件，確定了最佳提取工藝。通過(guò)薄層色譜法和高效液相色譜法考察了大孔吸附樹脂柱法純化和萃取法純化，確定了最佳純化工藝。在對(duì)懷菊花降壓有效部位的薄層色譜研究中，通過(guò)考察展開劑條件，對(duì)其進(jìn)行了薄層色譜研究。在對(duì)懷菊花降壓有效部位的含量測(cè)定研究中，通過(guò)紫外分光光度法和可

3、見(jiàn)分光光度法對(duì)其中的總黃酮（以蘆丁計(jì)）進(jìn)行了含量測(cè)定，采用高效液相色譜法同時(shí)對(duì)其中的隱綠原酸、綠原酸、新綠原酸、木犀草苷、3,4-O-二咖啡?；鼘幩帷?,5-O-二咖啡?；鼘幩?、4,5-O-二咖啡?；鼘幩徇M(jìn)行了含量測(cè)定，并進(jìn)行方法學(xué)考察，確定了懷菊花降壓有效部位的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。在懷菊花總黃酮部位的藥理實(shí)驗(yàn)研究中，通過(guò)在給藥后的第一天、第三天、第七天的第一小時(shí)、第二小時(shí)、第三小時(shí)、第四小時(shí)測(cè)量自發(fā)性高血壓模型大鼠的尾動(dòng)脈收縮壓，測(cè)定了時(shí)

4、效關(guān)系；懷菊花總黃酮部位分別按高、中、低劑量組灌胃給藥，測(cè)量自發(fā)性高血壓模型大鼠的尾動(dòng)脈收縮壓，測(cè)定了量效關(guān)系；按已測(cè)定的最佳劑量灌胃給藥兩周，測(cè)量自發(fā)性高血壓模型大鼠的尾動(dòng)脈收縮壓，觀察懷菊花總黃酮部位對(duì)自發(fā)性高血壓模型大鼠的尾動(dòng)脈收縮壓的影響。
　　結(jié)果：（1）懷菊花降壓有效部位的最佳提取溶劑為乙醇。最佳提取工藝為：80％乙醇作為提取溶劑，提取兩次，每次1h，第一次液料比為15:1，第二次液料比為10:1。（2）最佳純化工藝為

5、萃取法純化即：取濃縮液，加乙酸調(diào)至 pH=2左右，加乙酸乙酯1:1萃取兩次，合并乙酸乙酯層，加氫氧化鈉溶液調(diào)至 pH=7左右，回收乙酸乙酯，濃縮，減壓干燥。（3）薄層色譜研究結(jié)果顯示最佳展開劑為乙酸乙酯-甲酸-水（8:1:1），可檢視的特征斑點(diǎn)清晰，特異性強(qiáng)，且各斑點(diǎn)Rf值適中，可用于該提取物的定性鑒別。（4）紫外分光光度法和可見(jiàn)分光光度法測(cè)得懷菊花降壓有效部位中總黃酮含量分別為41.35%，48.98%。高效液相色譜法測(cè)得七種成分均線

6、性關(guān)系良好，平均回收率符合規(guī)定。該含量測(cè)定方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，可用于該提取物的定量控制。（5）結(jié)果顯示最佳時(shí)效為給藥后第三天第四小時(shí)，最佳劑量為中劑量即0.41g/kg.d，懷菊花總黃酮能顯著性降低自發(fā)性高血壓大鼠的血壓，與模型對(duì)照組比較差異顯著。
　　結(jié)論：最終確定了合理、可行的懷菊花降壓有效部位提取純化工藝；研究結(jié)果表明其質(zhì)量控制方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確度高、重復(fù)性好，可以有效地控制該提取物的質(zhì)量。懷菊花總黃酮能顯著性降低自發(fā)性高