新型納米材料佐劑和新型免疫原改造策略在HIV DNA疫苗研究中的應用.pdf

1、DNA疫苗是研制HIV疫苗的重要形式之一,在免疫早期發(fā)揮重要作用。理想的的HIV DNA疫苗應當具備克服DNA疫苗本身具有的弱免疫原性和HIV本身具有的高變異性的能力?；诖?本論文的工作有針對性的圍繞“提高HIV DNA疫苗的免疫原性”和“擴增HIV DNA疫苗的T細胞反應的廣譜性”這兩方面來展開。
　　 在“提高HIV DNA疫苗免疫原性”方面,我們選擇使用納米材料佐劑。實驗結果顯示:一種名叫富勒醇衍生物的納米材料作為佐劑可

2、很好的提高HIV Env DNA疫苗的T細胞反應水平和結合抗體滴度。在這部分試驗中,我們從不同疫苗劑量、不同佐劑使用濃度、不同疫苗免疫途徑等方面,在小鼠體內對該佐劑增強HIV EnvDNA疫苗免疫原性的效果做出評價。實驗結果顯示:該佐劑可在4μg、10μg和20μg三個疫苗劑量上,均可有效增強HIV Env的T細胞反應；并且在使用該佐劑的情況下,4μg的HIV Env DNA疫苗引發(fā)的T細胞反應與不使用該佐劑的20μg HIV Env

3、DNA疫苗所誘導的T細胞反應水平相當；另一方面,過高的佐劑濃度會抑制疫苗引發(fā)的免疫反應,只有在適當濃度范圍內,該佐劑才能發(fā)揮其增強疫苗免疫原性的作用；再一方面,該佐劑經皮內、肌肉、皮下三類途徑,均可有效增強HIV Env DNA疫苗的T細胞反應。最后,該佐劑對HIV Env結合抗體反應的增強也可被觀察到。
　　 在“擴增HIV DNA疫苗的T細胞反應的廣譜性”方面,我們采用“片段化”的免疫原改造策略。該方法大致為:將HIV Ga

4、g分成多個片段,再以每一片段為抗原分別構建DNA疫苗(即表達質粒),最后用它們混合免疫BalB/C小鼠,進而評價T細胞反應的廣譜性。實驗結果顯示:“片段化”策略確實可較好增加HIV Gag的T細胞反應的廣譜性；且一定程度上,該策略可削弱Gag上的表位優(yōu)勢現象,進而獲得更為均衡、廣譜的T細胞反應特征。同時我們還發(fā)現:在該實驗中,相比于免疫初免階段(priming stage),免疫加強階段(boosting srage)對廣譜性T細胞反應