小鼠骨髓基質細胞復合藻酸鹽異位成骨與成軟骨能力研究.pdf

1、在臨床醫(yī)學中，因創(chuàng)傷、感染、腫瘤術后及先天缺陷導致組織缺損的修復重建，一直是困擾各專業(yè)醫(yī)生的棘手問題。在口腔種植學領域，由于長期缺牙導致多數(shù)患者術區(qū)缺乏足夠的骨量，需要術前植骨。當前臨床上使用的自體骨、異體骨移植，以及其它各種組織修復與重建方法雖然各有優(yōu)缺點。組織工程是應用細胞生物學和工程學的原理，對病損組織結構、功能的修復與重建進行研究開發(fā)的一門新興科學。種子細胞是組織工程的首要因素，骨髓基質干細胞是近年來研究最熱門的種子細胞，被認為

2、是最有可能用于臨床的種子細胞之一。 本實驗通過分離BALB/C小鼠骨髓基質細胞，經過原代培養(yǎng)和定向誘導后將其復合藻酸鹽支架材料后植入體內觀察異位成骨、成軟骨能力。實驗采取貼壁法獲得骨髓基質細胞，并誘導培養(yǎng)其成骨、成軟骨表型，觀察細胞形態(tài)變化并進行免疫細胞化學、組織學染色以及分子生物學鑒定；再復合藻酸鹽凝膠，掃描電鏡觀察細胞與支架材料粘附情況；最后將細胞一支架復合體植入裸鼠皮下，于植入后4、8周取材，HE染色、免疫組織化學染色、R

3、T-PCR檢測異位形成的骨、軟骨組織。 研究結果顯示：骨髓基質細胞經過成骨和成軟骨誘導后可以表達明顯的成骨和成軟骨表型，掃描電鏡結果顯示細胞在藻酸鹽支架內良好的貼附和增殖。體內動物試驗證實，經過成軟骨誘導的BMSCs復合藻酸鹽后可以形成Col-Ⅱ 免疫組織化學染色陽性的軟骨樣組織；經過成骨誘導的BMSCs復合藻酸鹽支架后可以形成OCN免疫組化染色陽性，類似骨小梁的結構的骨樣組織。而RT-PCR結果也證實異位軟骨、骨組織可