IL-2上調(diào)SOCS-3表達(dá)抑制T細(xì)胞對特異性和異基因抗原免疫增殖反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究白介素2(IL-2)對同種異基因間混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)的影響，間接反映其對移植物抗宿主病(Graft Versus Host Disease，GVHD)的調(diào)節(jié)作用，論證SOCS-3(suppressors of cytokine signaling 3)基因在此過程中的作用與機(jī)制。 方法： 1．用IL-2(50U/mL)預(yù)孵育naive D011.10轉(zhuǎn)基因小鼠T細(xì)胞、C57BL/6小鼠脾細(xì)胞和nalve C57BL/

2、6小鼠CD4+T細(xì)胞，然后用OVA<,323-329>特異性抗原和BALB/c小鼠異基因抗原分別對其進(jìn)行刺激，測定naiveD011.10轉(zhuǎn)基因小鼠T細(xì)胞、C57BL/6小鼠脾細(xì)胞和nalve C57BL/6小鼠CD4+T細(xì)胞免疫增殖能力。 2．用IL-2預(yù)孵育nalve D011.10轉(zhuǎn)基因小鼠T細(xì)胞、C57BL/6小鼠脾細(xì)胞和nalve C57BL/6小鼠CD4+T細(xì)胞，檢測SOCS-3基因的表達(dá)變化。用OVA<,323-32

3、9>特異性抗原刺激活化D011.10轉(zhuǎn)基因小鼠T細(xì)胞，檢測T細(xì)胞經(jīng)抗原活化后SOCS-3基因的表達(dá)變化。 3．構(gòu)建pLX-SOCS3-SN載體，建立高表達(dá)SOCS-3基因的D011.10細(xì)胞(DS細(xì)胞)，用OVA<,323-329>特異性抗原刺激活化DS細(xì)胞，檢測DS細(xì)胞的免疫增殖能力。 結(jié)果： 1．Nalve D011-10轉(zhuǎn)基因小鼠T細(xì)胞、C57BL/6小鼠脾細(xì)胞和nalveC57BL/6小鼠CD4+T細(xì)胞經(jīng)IL-

4、2預(yù)孵育后對OVA<,323-329>特異性抗原和同種異基因抗原免疫增殖能力明顯減弱。 2．Nalve D011-10轉(zhuǎn)基因小鼠T細(xì)胞、C57BL/6小鼠脾細(xì)胞和nalveC57BL/6小鼠CD4+T細(xì)胞經(jīng)IL-2預(yù)孵育后，SOCS-3的表達(dá)明顯升高，在4-6h達(dá)到高峰。D011.10轉(zhuǎn)基因小鼠T細(xì)胞經(jīng)OVA<,323-329>硼特異性抗原刺激后SOCS-3的表達(dá)明顯降低，以2-3d最低。 3．高表達(dá)SOCS一3的DS細(xì)胞對