乳酸桿菌發(fā)酵濾液對(duì)人宮頸癌細(xì)胞株Hela細(xì)胞的抑制作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：宮頸癌發(fā)病率居?jì)D科惡性腫瘤首位，近年來發(fā)病率有明顯上升趨勢(shì)。本文通過觀察乳酸桿菌DM9811發(fā)酵濾液對(duì)宮頸癌細(xì)胞株Hela細(xì)胞的體外增殖、細(xì)胞周期、凋亡的影響，證實(shí)乳酸桿菌發(fā)酵濾液對(duì)宮頸癌細(xì)胞的抑制作用。并初步探討可能的機(jī)制，為進(jìn)一步確定乳酸桿菌DM9811發(fā)酵濾液中抑制宮頸癌的有效成份，從而開發(fā)出安全、有效、低成本的預(yù)防和治療宮頸癌的藥物打下基礎(chǔ)，并為開發(fā)乳桿菌制劑的新用途打開思路。 方法：1.用MTT法研究不同濃度乳酸

2、桿菌DM9811發(fā)酵濾液在不同時(shí)間對(duì)Hela細(xì)胞的抑制作用，在此基礎(chǔ)上研究脂肪酸、菌體核酸在不同時(shí)間對(duì)Hela細(xì)胞的抑制作用。2.用光鏡、電鏡和流式細(xì)胞儀分析不同濃度乳酸桿菌DM9811發(fā)酵濾液對(duì)Hela細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)。3.用流式細(xì)胞儀分析不同濃度乳酸桿菌DM9811發(fā)酵濾液對(duì)Hela細(xì)胞細(xì)胞周期的影響。 結(jié)果：1.不同濃度乳酸桿菌DM9811發(fā)酵濾液及相關(guān)物質(zhì)在不同時(shí)間對(duì)Hela細(xì)胞的抑制作用顯示：(1)乳酸桿菌DM9811發(fā)

3、酵濾液各濃度組對(duì)Hela細(xì)胞的生長(zhǎng)均有抑制作用，且這種抑制作用呈劑量-時(shí)間依賴方式。24h、48h、72h達(dá)到半數(shù)抑制率的發(fā)酵濾液濃度分別為8.9﹪、5.3﹪、3.8﹪。當(dāng)發(fā)酵濾液濃度達(dá)10﹪，作用時(shí)間為24、48、72小時(shí)時(shí)抑制率分別為55.1﹪、63.8﹪、71.2﹪，陽性對(duì)照順鉑的抑制率為52.6﹪、62.9﹪、72.0﹪，其抑制作用與化療藥物順鉑的抑制作用無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。(2)乳酸桿菌DM9811發(fā)酵濾液脂肪酸對(duì)Hela細(xì)胞的生長(zhǎng)

4、有一定抑制作用，抑制率在7.0-34.0﹪之間。(3)乳酸桿菌DM9811菌體核酸對(duì)Hela細(xì)胞的生長(zhǎng)有抑制作用，抑制率為9.7-53.4﹪，呈劑量-時(shí)間依賴方式。72h達(dá)到半數(shù)抑制率核酸的濃度為5.5μg/ml。 2.乳酸桿菌DM9811發(fā)酵濾液可誘導(dǎo)宮頸癌Hela細(xì)胞凋亡。形態(tài)學(xué)觀察Hela細(xì)胞，可見細(xì)胞變形，細(xì)胞皺縮，體積變小，細(xì)胞間隙增大，細(xì)胞核固縮。流式細(xì)胞儀分析，1﹪、2﹪的乳酸桿菌DM9811發(fā)酵濾液在48h、72