腸道病毒71型中和抗體的制備.pdf

1、腸道病毒71型(EV71)屬于人類小核糖核酸病毒科腸道病毒屬腸道病毒A種病毒，同柯薩奇病毒16型(CA16)一道，是引發(fā)手足口病(HFMD)的兩種主要病原體。雖然手足口病的臨床癥狀表現(xiàn)為輕微的發(fā)疹及發(fā)燒癥狀，但是EV71病毒的感染能夠引發(fā)嚴(yán)重的神經(jīng)疾病，如致死性腦炎，無(wú)菌性腦膜炎，急性松弛性麻痹，而CA16病毒的感染一般不會(huì)導(dǎo)致這些疾病。
　　EV71病毒主要感染小孩，特別是嬰幼兒，其病毒于1969年在加利福尼亞的一個(gè)患有致死性腦

2、炎的9個(gè)月大的嬰兒中第一次分離得到的。手足口病在很多國(guó)家和地區(qū)中廣泛流行著。近年來(lái)，在馬來(lái)西亞、新加坡、臺(tái)灣、日本、韓國(guó)、越南和中國(guó)大陸等東南亞和東亞的國(guó)家和地區(qū)經(jīng)常會(huì)有手足口病的大爆發(fā)。目前由于沒(méi)有合適的疫苗和抗病毒藥物，還不能治療由EV71感染導(dǎo)致的手足口病。在EV71感染過(guò)程中會(huì)發(fā)生依賴于抗體的病毒感染增強(qiáng)現(xiàn)象，這給疫苗治療制造了一些困難?？贵w這種被動(dòng)免疫治療的藥物，也許是治療手足口病的新希望。
　　在本實(shí)驗(yàn)中我們選用EV7

3、1-HM003207病毒株，該病毒株屬于目前國(guó)內(nèi)EV71感染病例中最常見(jiàn)的病毒C4亞型。用EV71活病毒、VP1-GST融合蛋白以及偶聯(lián)上血藍(lán)蛋白(KLH)的SP55、SP70和VP2-28三條中和線性表位肽作為三種免疫原成分免疫BALB/C小鼠，而后雜交瘤細(xì)胞技術(shù)結(jié)合酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)，篩選到了14株強(qiáng)結(jié)合型單克隆抗體。在橫紋肌瘤細(xì)胞(RD)和神經(jīng)細(xì)胞(SKNSH)上檢測(cè)單克隆抗體的中和保護(hù)作用，結(jié)果顯示有四株單克隆抗體在