Alloxan誘導的SD大鼠糖尿病模型視網(wǎng)膜FAS和E-FABP表達變化及分析.pdf

1、目的:糖尿病視網(wǎng)膜病變是糖尿病最常見和嚴重的并發(fā)癥。幾十年來，糖尿病視網(wǎng)膜病變的發(fā)病機制都是一個重要的課題，學者們在大量實驗的基礎(chǔ)上提出了許多有價值的假設(shè)和猜想。然而其發(fā)病機制仍然沒有一個定論。胰島素是調(diào)節(jié)脂肪合成的主要激素，糖尿病患者因為胰島素的缺乏出現(xiàn)脂肪代謝的異常。脂肪酸合成酶(fatty acid synthase。FAS)是脂肪酸合成的關(guān)鍵酶，參與催化由乙酰輔酶A和丙二酸單酰輔酶A合成軟脂酸的整個過程。脂肪酸結(jié)合蛋白(fatt

2、y acid-binding。proteins FABPs)是細胞內(nèi)的脂肪酸載體，具有組織特異性。除了主要參與細胞內(nèi)脂肪酸的轉(zhuǎn)運外還參與相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)。在視網(wǎng)膜中Epidermal-FABP(E-FABP，F(xiàn)ABP5)有表達。我們此次實驗的目的是通過建立SD大鼠糖尿病模型，應用RT-PCR以及免疫組化的方法觀察FAS和E-FABP在糖尿病大鼠視網(wǎng)膜中的表達變化，并對FAS和E-FABP在糖尿病發(fā)病機制中的可能作用進行探討。 方

3、法: 1．正常SD大鼠腹腔注射四氧嘧啶(Alloxan)誘導制成糖尿病模型，設(shè)置正常對照組，于糖尿病12周取材分析。 2．通過半定量RT-PCR方法對FAS和E-FABP在12周糖尿病大鼠視網(wǎng)膜中的mRNA表達水平進行觀察。 3．應用免疫組織化學的方法觀察FAS和E-FABP在12周糖尿病大鼠視網(wǎng)膜中的表達情況。 結(jié)果: 1．成功建立糖尿病SD大鼠模型，模型鼠均出現(xiàn)不同程度的糖尿病典型癥狀。共獲得

4、糖尿病12周模型鼠標本8例。 2．半定量RT-PCR實驗結(jié)果顯示：糖尿病組大鼠視網(wǎng)膜FAS的mRNA表達水平比對照組明顯增高(P<0.01)。E-FABPmRNA表達水平兩者之間無統(tǒng)計學差別。 3．免疫組織化學實驗結(jié)果顯示：FAS主要在視網(wǎng)膜視錐視桿細胞的內(nèi)節(jié)段表達，在外叢狀層、內(nèi)叢狀層、內(nèi)核層、神經(jīng)纖維層可見少量表達。糖尿病組大鼠視網(wǎng)膜FAS表達與對照組相比染色明顯增強，細胞陽性率增高。E-FABP主要在外核層、外從狀