RNAi沉默Bcl-2基因抑制膀胱癌生長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文RNAi沉默Bcl2基因抑制膀胱癌生長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn)研究ExperimentalstudiesontheinhibitionofbladdercancergrowthbyRNAisilencingBcl2gene單位：中山大學(xué)附屬第二醫(yī)院專業(yè)：外科學(xué)(泌外)博士研究生：許可慰導(dǎo)師：黃健教授學(xué)位類型：醫(yī)學(xué)博士(臨床型)答辯委員會(huì)：(主席)(委員)2007年4月廣州@中’刪懣探討其臨床意義，為下一步探索以細(xì)胞凋亡調(diào)控為切入點(diǎn)的膀

2、胱癌新的治療途徑提供依據(jù)。盡管抗Bel2的治療策略在腫瘤治療領(lǐng)域具有廣闊的前景，但目前還缺乏行之有效的方法來(lái)高效特異地抑制腫瘤細(xì)胞Bcl2的表達(dá)，從而達(dá)到抗腫瘤的最終目標(biāo)。新興的RNA干擾(RNAinterference，RNAi)技術(shù)，被證實(shí)具有高效、穩(wěn)定、特異的基因阻斷作用，為實(shí)現(xiàn)抗Bcl2的腫瘤治療策略提供了可能。本研究的第二部分是運(yùn)用RNAi技術(shù)，以凋亡抑制基因Bcl2為靶基因，構(gòu)建Bcl2siRNA的真核表達(dá)載體，并在膀胱癌細(xì)

3、胞株進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)檢測(cè)其沉默Bcl2表達(dá)的生物學(xué)效應(yīng)。本研究的第三部分則進(jìn)一步構(gòu)建膀胱癌的動(dòng)物模型，在荷瘤動(dòng)物體內(nèi)探討B(tài)el2siRNA的抗腫瘤效應(yīng)，為今后進(jìn)一步開展膀胱癌基因治療提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。第一部分膀胱移行細(xì)胞癌組織中Bcl2、Survivin、突變型p53的表達(dá)及臨床意義目的：探討膀胱移行細(xì)胞癌(BTCC)中Bcl2、Survivin、突變型p53蛋白的表達(dá)、相關(guān)性及臨床意義。材料和方法：應(yīng)用免疫組織化學(xué)鏈酶卵白素一過氧化物酶復(fù)合物

4、(sP)方法，檢測(cè)78例BTCC組織標(biāo)本中Bel2、Survivin、突變型p53蛋白的表達(dá)，并與15例正常膀胱黏膜組織進(jìn)行對(duì)照研究。結(jié)合臨床與病理資料，分析各指標(biāo)與腫瘤進(jìn)展的關(guān)系。結(jié)果：78例BTCC中，Bcl2蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率為551％，Survivin陽(yáng)性率654％，突變型p53陽(yáng)性率4870，而正常膀胱黏膜組織中未見Survivin、突變型p53蛋白陽(yáng)性表達(dá)。Bcl2、Survivin蛋白表達(dá)與BTCC的病理分級(jí)、臨床分期以及有