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1、目的:建立流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞微粒(Microparticles)的方法;比較不同抗凝劑,不加抗凝劑以及放置時(shí)間對(duì)細(xì)胞微粒測(cè)定的影響;探討細(xì)胞微粒與冠心病(CAD)之間的關(guān)系。 方法: 1、12例正常健康人抽取肘部靜脈血,分作三管:不加抗凝劑,枸櫞酸鈉和EDTA—K2抗凝,并在1小時(shí)內(nèi)、室溫放置4小時(shí)以及4℃放置24小時(shí)(放置的血漿或血清均與血球分離)分別對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞微粒(CD31+/CD42-)與血小板微粒(CD31+1C
2、D42+)進(jìn)行計(jì)數(shù)。 2、收集36例冠心病患者標(biāo)本(12例心肌梗死,12例不穩(wěn)定型心絞痛和12例穩(wěn)定型心絞痛),并在4小時(shí)內(nèi)對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞與血小板微粒進(jìn)行計(jì)數(shù)。 結(jié)果: 1、枸櫞酸鈉抗凝血漿內(nèi)皮細(xì)胞微粒在1小時(shí)內(nèi)、4小時(shí)和24小時(shí)測(cè)定值分別為57.4±57.7/μL、53.9±52.6/μL和45.7±38.3/μL,1小時(shí)內(nèi)測(cè)定值與4小時(shí),24小時(shí)的測(cè)定值相比,差異無(wú)顯著性意義,P值分別為0.103,0.082。
3、 2、血小板微粒的結(jié)果分別為1092.4±883.1/μL,1049.0±831.9/μL和739.7±604.5/μL,1小時(shí)內(nèi)測(cè)定值與4小時(shí)的測(cè)定值差異無(wú)顯著性意義,但顯著高于放置24小時(shí)的測(cè)定值, P值分別為0.091,0,006。 3、4小時(shí)內(nèi)EDTA—K2抗凝血漿內(nèi)皮細(xì)胞微粒,血小板微粒的測(cè)定值分別為7.6±6.6/μL和137.4±115.5/μL,顯著低于同時(shí)間枸櫞酸鈉抗凝血漿的測(cè)定值,P值分別為0.007,
4、0.002。未加抗凝劑血清管幾乎測(cè)不到本實(shí)驗(yàn)的兩種細(xì)胞微粒。 4、急性冠脈綜合癥患者(心肌梗死組和不穩(wěn)定型心絞痛組)內(nèi)皮細(xì)胞微粒計(jì)數(shù)顯著高于穩(wěn)定型心絞痛組和正常對(duì)照組(P<0.05),后兩組結(jié)果差異無(wú)顯著性意義(P=0.394.)。內(nèi)皮細(xì)胞微粒計(jì)數(shù)結(jié)果在三組患者當(dāng)中差異具有顯著性意義,心肌梗死組>不穩(wěn)定型心絞痛組>穩(wěn)定型心絞痛組。但血小板微粒結(jié)果在上述相鄰兩組間差異不具顯著性意義。 結(jié)論:流式細(xì)胞儀測(cè)定CD31+,CD4
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