活體共焦顯微鏡下正常人瞼結膜及瞼板腺的年齡變化及性別差異.pdf

1、近年來,干眼的患病率逐漸上升,已成為眼科常見疾病之一,相關研究是目前眼科研究的熱點之一。其中,瞼板腺(Meibomianglands,MGs)功能障礙所致蒸發(fā)過強型干眼占有較大比例。瞼板腺分泌多種脂質成分,構成淚膜的脂質層,影響淚液蒸發(fā)及淚膜的穩(wěn)定性,因此,瞼板腺的數量及形態(tài)的變化對維持穩(wěn)定的眼表至關重要。既往研究對瞼板腺的觀察主要為病理學研究及動物實驗,目前尚無涉及正常人群的瞼板腺和瞼結膜變化的研究報道;正常人活體狀態(tài)下瞼板腺的形態(tài)及

2、密度是否受到性別差異、年齡變化、激素水平及生活環(huán)境等內外因素的影響而發(fā)生改變,也尚不清楚。近年來問世的激光活體共焦顯微鏡為動態(tài)觀察眼表組織在活體狀態(tài)下的情況提供了有力工具。本研究通過激光活體共焦顯微鏡(LaserConfocalmicroscopy,LSCM)觀察四個年齡段組正常人群瞼結膜及瞼板腺的組織結構,探討瞼結膜上皮細胞(PalpebralCpnjunctivaepithelialcells)、杯狀細胞(Gobletcells,G

3、Cs)、樹突狀細胞(Dendriticcells,DCs)及瞼板腺腺泡細胞的密度和形態(tài),并探討其與年齡和性別的相關性。
　　第一部分
　　活體共焦顯微鏡下正常人瞼結膜及瞼板腺的年齡變化
　　目的:應用活體LSCM觀察正常人瞼結膜及瞼板腺組織細胞結構的年齡變化。
　　方法:選擇正常人86例86只眼,按年齡進行分組,A組為0～20歲,B組為21～40歲、C組為41～60歲、D組為61歲以上,每組約20例。翻轉上瞼,距

4、瞼緣約5mm使用LSCM觀察瞼結膜及瞼板腺組織細胞結構并記錄圖像,計算結膜上皮細胞、GCs、Des、MGs腺泡細胞密度及MGs腺泡的直徑并進行方差分析,若有統(tǒng)計學意義再行最小顯著性差異(Leastsignficantdifference,LsD)檢驗。評價瞼結膜及MGs組織細胞結構的年齡變化。
　　結果:(1)在共焦顯微鏡下,可見瞼結膜上皮淺表層細胞的胞體較大、胞質低反光、周邊高反光,排列松散,細胞邊界模糊、高反光,形態(tài)似圓形、卵

5、圓形。上皮的形態(tài)與其正常生理代謝過程關系密切,形態(tài)越扁平,而積越大,則越接近上皮表層。瞼結膜基底層在共焦顯微鏡下表現為周邊邊界高亮而清晰的近圓形、卵圓形細胞,細胞質呈低反光。由于基底層較貼近瞼板腺且邊界較清晰,因此我們統(tǒng)計瞼結膜上皮細胞基底層細胞的密度,在A、B、C、D各組的平均密度分別為5357±304,4917±413,4925±521,4943±484(個/mm2);使用方差分析,組間具有統(tǒng)計學差異(p=0.002,F=5.217

6、),但未隨年齡增長而降低。(2)GCs是淚膜黏液層的主要來源,對于維持淚膜穩(wěn)定性起重要作用。GCs胞體較大、胞內充滿透亮顆粒、成團或散在分布的卵圓形或圓形細胞,體積為周圍的上皮細胞的約3倍,四組中GCs密度分別為1422±590,1409±711,791±457,779±546(個/mm2),用方差分析,差異具有統(tǒng)計學意義(p=0.000,F=14.168);(3)DC是目前所指的機體內功能最強的抗原提呈細胞,在共焦顯微鏡下形態(tài)呈胞體小

7、,呈高亮反光,散在分布,可為缺乏或長形或鐵絲網狀的樹突狀形態(tài)。各組平均的DCs細胞密度為29±15,30±12,41±23,36±15(個/mm2),采用方差分析,未見明顯的年齡相關變化(p=0.06,F=2.573)。(4)MGs腺泡細胞因光學切面不同,呈現不同形態(tài),腺泡外圈為輪胎樣上皮細胞,伴有高亮反光顆粒,胞腔內呈灰色偶伴點狀高反光分泌物,團狀聚集分布,排列不規(guī)則。A～D組細胞密度分別為92±26,86±27,62±20,56±1

8、6(個/mm2),運用方差分析,差異有統(tǒng)計學意義(p=0.000,13.133)。MG腺泡單位的直徑,A～D組分別為99.06±16.64,98.22±18.77,85.91±15.55,88.26±16.71(μm),使用方差分析,差異有統(tǒng)計學意義(p=0.022,F=3.385),但未隨著年齡而明顯縮小。
　　結論:LSCM可清晰觀察正常人群瞼結膜和瞼板腺的微觀組織結構。瞼結膜上皮細胞結構及DC密度無明顯年齡改變;GCs及MG

9、腺泡細胞密度及DC分支形態(tài)隨年齡增長有退化趨勢,提示瞼板腺功能降低。
　　第二部分
　　活體共焦顯微鏡下正常人瞼結膜及瞼板腺的性別差異
　　目的:應用活體LSCM觀察正常人瞼板腺瞼結膜及瞼板腺組織細胞結構的性別差異。
　　方法:選擇正常人86例86只眼,按性別、40歲上下進行分組,A組為男性、年齡0～40歲,B組為女性、年齡0～40歲,C組為男性、年齡41歲以上、D組為女性、年齡41歲以上,每組約20例。翻轉上瞼

10、,距瞼緣約5mm使用LSCM觀察瞼結膜及瞼板腺組織細胞結構并記錄圖像,計算結膜上皮細胞、杯狀細胞、樹突狀細胞、瞼板腺腺泡細胞密度及瞼板腺腺泡的直徑并進行t檢驗,評價瞼結膜及瞼板腺組織細胞結構的性別差異。
　　結果:(1)瞼結膜上皮細胞,在LSCM下,A、B、C、D各組的基底層細胞平均密度分別為5162±324,5042±608,4902+374,5047+345(個/mm2);使用t檢驗,40歲以下(p=0.469,t=0.827

11、)及41歲以上(p=0.607,t=1.295)組間不具有統(tǒng)計學差異。(2)GCs,于四組中密度分別為1406±496,1426±367,840±375,744±307(個/mm2),使用t檢驗,不論40歲以下(p=0.288,t=-0.135)及41歲以上(p=0.406,t=0.801)皆未發(fā)現具有統(tǒng)計學意義。(3)DCs各組平均的Dc密度為28±12,30±13,46±20,34±18(個/mm2),使用t檢驗,40歲以下(p=0

12、.551,t=-0.310)及41歲以上(p=0.149,t=2.010)未見明顯的統(tǒng)計學差異。(4)MG腺泡細胞,A～D組細胞密度分別為86±26,95±24,59±17,58+19(個/mm2),使用t檢驗,40歲以下(p=0.566,t=-1.130)及41歲以上(p=0.550,t=0.285)未見明顯的統(tǒng)計學差異。MGs腺泡單位的直徑,A～D組分別為96.30+14.98,99.54±19.45,92.72±16.79,84.