擬用于中藥及藥用植物分析的熒光標(biāo)記試劑研究.pdf

1、中藥化學(xué)成分非常復(fù)雜，由多個(gè)中藥組成的復(fù)方成分就更復(fù)雜了，這給質(zhì)量控制帶來(lái)了極大的挑戰(zhàn)。面對(duì)中藥多成分復(fù)雜體系，特別是湯劑中極性大的成分，高靈敏度、高選擇性的分析方法就顯得非常重要，而這恰恰是中藥分析和質(zhì)量控制中的瓶頸問(wèn)題。針對(duì)多成分體系，液相色譜是很好的選擇，但湯劑中成分的極性很大，在常用反相柱上保留時(shí)間很短，很難達(dá)到有效分離。大多數(shù)成分沒(méi)有紫外吸收官能團(tuán)，難以進(jìn)行高靈敏度檢測(cè)。這些問(wèn)題和挑戰(zhàn)的存在呼喚著新的研究策略，以適應(yīng)對(duì)高靈敏度

2、、高選擇性分析方法的需求。
　　 在研究單萜吲哚生物堿的仿生合成過(guò)程中發(fā)現(xiàn)裂環(huán)馬錢(qián)素在不同pH值時(shí)會(huì)發(fā)生不同的重排轉(zhuǎn)化，因此推測(cè)單萜吲哚生物堿結(jié)構(gòu)多樣性的一個(gè)重要原因可能源于植物體中不同pH值的影響。如果能夠證實(shí)pH值能夠影響次生代謝產(chǎn)物的合成，則對(duì)揭示次生代謝產(chǎn)物的生物合成途徑有很大的幫助，也有可能通過(guò)化學(xué)或生物的方法來(lái)調(diào)節(jié)植物體內(nèi)的pH值定向提高特定目標(biāo)產(chǎn)物的產(chǎn)率，因此不僅具有重要的理論意義，也具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。
　

3、　 針對(duì)上述問(wèn)題，本文開(kāi)展了以下工作：以間苯二酚，鄰苯二甲酸酐，偏三苯酐為原料，采用一步法、分步法合成了三種熒光素母體，并對(duì)合成工藝進(jìn)行了優(yōu)化，對(duì)目標(biāo)化合物進(jìn)行了結(jié)構(gòu)表征。為了增加熒光素對(duì)pH值的敏感性，以3種熒光素母體為原料，設(shè)計(jì)合成了兩類(lèi)熒光素衍生物：熒光素氨基酸衍生物，熒光素環(huán)狀仲胺衍生物，共計(jì)16個(gè)衍生物，并對(duì)化合物進(jìn)行了結(jié)構(gòu)表征，所有化合物均為首次合成。采用熒光分光光度計(jì)對(duì)合成衍生物的熒光性質(zhì)進(jìn)行了測(cè)定，得到了化合物的熒光激

4、發(fā)，發(fā)射圖譜，確定了化合物的最大激發(fā)，發(fā)射波長(zhǎng)；測(cè)定兩類(lèi)化合物在不同pH值條件下的熒光發(fā)射光譜，確定了它們對(duì)pH值的響應(yīng)規(guī)律。
　　 針對(duì)醛酮類(lèi)化合物特有的官能團(tuán)，設(shè)計(jì)合成了兩種氨基熒光素和一種氨基香豆素；開(kāi)發(fā)了一種溫和的二氫吡啶還原劑，利用還原胺化反應(yīng)對(duì)醛酮類(lèi)化合物進(jìn)行了標(biāo)記實(shí)驗(yàn)，最終以氨基香豆素成功標(biāo)記了10個(gè)醛類(lèi)化合物，對(duì)標(biāo)記結(jié)果進(jìn)行了結(jié)構(gòu)表征。
　　 針對(duì)氨基酸類(lèi)化合物特有的官能團(tuán)，合成了兩種羥基熒光試劑，在曼尼