蛇毒解離素抗骨質(zhì)疏松作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：觀察蛇毒解離素對(duì)去卵巢大鼠體重、子宮濕重、骨密度（Bone MineralDensity,BMD）、骨代謝生化指標(biāo)、骨小梁顯微結(jié)構(gòu)的影響，了解蛇毒解離素對(duì)去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松的治療作用，并通過(guò)利用RAW264.7小鼠巨噬細(xì)胞株（破骨前驅(qū)細(xì)胞株）加入細(xì)胞因子RANKL誘導(dǎo)破骨細(xì)胞形成，研究蛇毒解離素對(duì)體外培養(yǎng)的破骨前驅(qū)細(xì)胞形成及分化的影響，從而初步探討其作用機(jī)制。
　　方法：1、選用40只3月齡SD雌性末孕大鼠，隨機(jī)分為5組每組

2、8只：假手術(shù)組（Sham）、模型組（OVX）、戊酸雌二醇組（E）、蛇毒解離素高劑量組（D1）、低劑量組（D2）。采用手術(shù)切除大鼠卵巢方法建立絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥模型，Sham組僅切除卵巢周圍部分脂肪組織。術(shù)后4周開始給藥，其中 E組給予戊酸雌二醇0.8mg/kg.d，D1、D2組分別給予蛇毒解離素100、25mg/kg.d，Sham組和OVX組給予蒸餾水9ml/kg.d。術(shù)后12周活體測(cè)量股骨骨密度后處死大鼠，迅速摘取子宮，稱取濕重，獲取大

3、鼠血清、股骨標(biāo)本，分別測(cè)定血鈣、血磷、堿性磷酸酶（Alkaline Phosphatase,ALP）及骨小梁顯微結(jié)構(gòu)。
　　2、采用小鼠巨噬細(xì)胞株RAW264.7,加入細(xì)胞因子RANKL誘導(dǎo)破骨細(xì)胞樣細(xì)胞形成。并在誘導(dǎo)破骨細(xì)胞樣細(xì)胞形成的過(guò)程中加入濃度為100ug/ul、10ug/ul蛇毒解離素,6天后進(jìn)行TRAP抗酒石酸酸性磷酸酶染色,觀察破骨細(xì)胞形態(tài)和蛇毒解離素對(duì)破骨細(xì)胞形成數(shù)目的影響。
　　研究結(jié)果：1.與模型組相比，

4、蛇毒解離素各劑量組骨密度升高（P<0.05），骨小梁顯微結(jié)構(gòu)明顯改善（P<0.05），ALP測(cè)定值明顯下降（P<0.05），血鈣、血磷測(cè)定值明顯升高（P<0.05）；與戊酸雌二醇組比較，蛇毒解離素各劑量組子宮濕重顯著減輕（P<0.01）。2.蛇毒解離素對(duì)破骨細(xì)胞的形成和分化具有抑制作用。藥物濃度越低則形成的破骨細(xì)胞樣細(xì)胞數(shù)目越多。加藥組與對(duì)照組相比，形成的破骨細(xì)胞樣細(xì)胞數(shù)量經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。說(shuō)明了蛇毒解離素對(duì)