針灸預處理對老年性癡呆模型大鼠Wnt信號轉導通路影響的實驗研究.pdf

1、目的: 建立AD大鼠模型，探討針灸預處理對老年性癡呆模型大鼠Wnt1信號轉導通路的影響，揭示針灸防治AD的機制。 方法: 在大鼠雙側海馬區(qū)注射Aβ25-35，建立AD大鼠模型，分別隨機分為正常組、假手術組、模型組、預艾灸組、預電針組、預電針加灸組，一共6組，每組各20只。通過預電針和預艾灸大鼠的百會和腎俞穴28天后，觀察各組大鼠wnt信號轉導相關指標的變化。通過Morris水迷宮檢測行為學，免疫組化和免疫印跡檢測

2、大鼠海馬組織軸蛋白和β—連環(huán)蛋白，通過酶聯(lián)免疫法檢測蛋白質磷酸酶2A和糖原合酶激酶-3β的活性，通過實時定量PCR技術檢測Wnt1基因表達，并通過超微電鏡觀察海馬組織超微病理變化。 結果: 1．水迷宮檢測行為學發(fā)現(xiàn)模型組大鼠學習記憶能力有明顯損害，其平均潛伏期、經(jīng)過中心區(qū)域的比例、平均游過的路徑距離與正常組和假手術組有顯著差異(p＜0.01)，而預電針和預艾灸對其有明顯的預防和改善作用，其中以預電針加灸的療效最好。

3、 2．通過免疫組化和免疫印跡觀察到模型組大鼠海馬組織軸蛋白表達明顯上調，β—連環(huán)蛋白表達明顯下調，而預艾灸、預電針、預電針加灸對此具有不同程度的調節(jié)作用。 3．通過酶聯(lián)免疫法觀察到模型組GSK-3β的活性比正常組亦明顯升高(p＜0.01)，而PP2A的活性比正常組和假手術組明顯降低。預電針和預艾灸均可起到調節(jié)作用。 4．病理組織切片觀察到AD大鼠腦組織海馬區(qū)神經(jīng)元均有不同程度的破壞，預電針和預艾灸對海馬區(qū)神經(jīng)元的損傷具

4、有明顯的保護作用。 5．通過實時定量PCR技術檢測Wnt1基因表達，觀察到模型組大鼠海馬Wnt1信號異常減弱，與正常組和假手術組比較有顯著性差異(p＜0.01)。而預艾灸組、預電針組、預電針加灸組大鼠海馬Wnt1的信號均有不同程度的增強。 結論: 1．老年性癡呆的基本病機為髓海不足、神機失用，針灸治療的法則為益精填髓，醒神開竅。百會和腎俞可作為防治該病的首選要穴。 2．預電針和預艾灸對于AD模型大鼠的神經(jīng)