PomGnT1在膠質瘤中惡性作用的機制研究.pdf

1、目的:研究PomGnT1在膠質瘤中的表達及其與膠質瘤惡性作用的相關性。探討PomGnT1在膠質瘤中發(fā)揮惡性作用的細胞行為學現(xiàn)象，揭示PomGnT1參與膠質瘤惡性作用的分子生物學機制，為未來開發(fā)潛在的膠質瘤治療靶向藥物提供理論依據(jù)。
　　方法:通過免疫組化檢測PomGnT1蛋白在133例不同級別的膠質瘤組織芯片中的表達情況;Kruskal-WallisH檢驗和Spearman相關分析研究PomGnT1與膠質瘤的級別相關性;受試者工作

2、特征曲線(ROC)用于分析PomGnT1在膠質瘤級別中的診斷價值。通過組織蛋白芯片、生物數(shù)據(jù)庫分析、免疫組化及K-M生存分析法對TCGA數(shù)據(jù)庫和本單位中的膠質母細胞瘤(GBM)組織樣本進行生存分析，研究PomGnT1mRNA和蛋白表達水平與GBM生存預后的相關性。構建PomGnT1過表達及敲弱U87、U251穩(wěn)轉細胞株，進一步通過侵襲實驗、增殖實驗和粘附實驗研究PomGnT1在U87、U251細胞系中的惡性生物學行為。建立原位腦膠質瘤動

3、物模型，MR磁共振成像觀察成瘤大小，并進行動物的生存分析。通過westernblotting、ChIp實驗研究PomGnT1的上下游分子信號通路。
　　結果:PomGnT1的表達與膠質瘤的級別呈正相關，并且能夠作為鑒別低級別膠質瘤和高級別膠質瘤的診斷指標;在GBM中，PomGnT1高表達，且與GBM患者的生存預后相關。PomGnT1表達高，則GBM患者的生存時間減少。通過將PomGnT1過表達與敲弱的U87、U251穩(wěn)轉株的細胞行

4、為學實驗發(fā)現(xiàn):PomGnT1能夠促進膠質瘤細胞的侵襲、增殖，抑制膠質瘤細胞的粘附行為。在原位腦膠質瘤動物活體上，PomGnT1能夠促進膠質瘤的生長，并且與動物的預后相關。分子水平上，EGFR通路能夠促進PomGnT1表達，且PomGnT1受到轉錄因子USF2調控;下游通路中，PomGnT1能夠抑制RPTPβ，進而使得β-catenin被磷酸化激活，活化位點涉及到β-catenin的酪氨酸654和333殘基。最后，β-catenin的激活