甘草次酸對(duì)白血病細(xì)胞侵襲和遷移能力的影響及機(jī)制探討.pdf

1、目的：觀察甘草次酸（Glycyrrhetinic acid，GA）對(duì)白血病細(xì)胞侵襲和遷移能力的影響，并探討其機(jī)制。 方法：選擇人髓性白血病細(xì)胞K562、HL-60細(xì)胞為研究對(duì)象。MTT法檢測(cè)不同濃度GA作用于K562和HL-60細(xì)胞不同時(shí)間后細(xì)胞的增殖抑制率；采用Transwell小室基質(zhì)膠侵襲實(shí)驗(yàn)及趨化實(shí)驗(yàn)觀察GA對(duì)K562、HL-60細(xì)胞株侵襲及遷移能力的影響；半定量RT-PCR法檢測(cè)GA對(duì)K562、HL-60細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋

2、白酶MMP-2和MMP-9mRNA表達(dá)的影響；用免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)不同濃度GA對(duì)K562、HL-60細(xì)胞MMP-2和MMP-9蛋白表達(dá)的水平的影響；明膠酶譜法檢測(cè)GA對(duì)兩種細(xì)胞株MMP-2和MMP-9活性的影響。 結(jié)果：1.GA可明顯抑制K562、HL-60細(xì)胞增殖，其作用呈時(shí)間劑量依賴性。2.不同濃度GA（30、60、120μmol?L-1）作用K562、HL-60細(xì)胞24小時(shí)后，可明顯抑制K562、HL-60細(xì)胞的侵襲能

3、力和遷移能力，并呈劑量依賴關(guān)系。3.GA作用K562、HL-60細(xì)胞48小時(shí)后，可抑制K562、HL-60細(xì)胞中MMP-2、MMP-9mRNA的表達(dá)。K562細(xì)胞中，與對(duì)照組相比，30μmol?L-1 GA組對(duì)MMP-2mRNA表達(dá)無顯著性差異（P>0.05），60、120μmol?L-1組有顯著性差異（P<0.05），MMP-9各組與對(duì)照組比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。HL-60細(xì)胞中，與對(duì)照組比，MMP-2mRNA表達(dá)量30、

4、60、120μmol?L-1組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。MMP-9表達(dá)量各組均有顯著性差異（30μmol?L-1組，P<0.05；60、120μmol?L-1組P<0.01）。4. GA作用K562、HL-60細(xì)胞48小時(shí)后，可抑制K562、HL-60細(xì)胞中MMP-2、MMP-9蛋白的表達(dá)。K562細(xì)胞中，與對(duì)照組相比，30μmol?L-1 GA組對(duì)MMP-2、MMP-9蛋白表達(dá)無顯著性差異（P>0.05），60、120μmol?L

5、-1組有顯著性差異（P<0.05）；HL-60細(xì)胞中，MMP-2的表達(dá)，60、120μmol?L-1與對(duì)照組比較有顯著性差異（P<0.05）；MMP-9的表達(dá)，GA處理組各濃度與對(duì)照組比較均有顯著性差異（P<0.05）。5.GA可抑制K562、HL-60細(xì)胞株明膠酶活性，呈劑量依賴性。K562細(xì)胞僅出現(xiàn)MMP-2條帶，HL-60細(xì)胞檢測(cè)到MMP-2和MMP-9的條帶。K562和HL-60細(xì)胞，GA處理組與對(duì)照組比較，60、120μmol