實(shí)驗(yàn)性動(dòng)脈粥樣硬化兔血管壁白藜三醇結(jié)合蛋白與ERK表達(dá)水平及白藜三醇對(duì)其干預(yù)作用的研究.pdf

1、目的：研究實(shí)驗(yàn)性動(dòng)脈粥樣硬化(Atherosclerosis，AS)兔血管壁白藜三醇結(jié)合蛋白(Resveratrol-binding protein,RBP)-NQO2、GST-pi，ERK表達(dá)水平及白藜三醇(Resveratrol，RV)對(duì)其干預(yù)的作用，初步探討白藜三醇對(duì)RBPs表達(dá)的影響，闡述動(dòng)脈粥樣硬化程度與RBP表達(dá)的關(guān)系，研究白藜三醇抗動(dòng)脈粥樣硬化的可能機(jī)制，為白藜三醇作為冠心病新的靶向治療提供理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方

2、法：以高脂飲食聯(lián)合免疫損傷的方法建立兔的動(dòng)脈粥樣硬化模型：28只雄性日本大耳白兔隨機(jī)分成4組，分別為：正常對(duì)照(Control)組，即C組，喂飼正常飼料6周；動(dòng)脈粥樣硬化(AS)組，即AS組，予小牛血清1mg/ml耳緣靜脈一次性注射后，即喂飼高脂飼料6周；白藜三醇喂飼6周(Fed RV For Six Weeks)組，即S-RV組，采用與AS組相同的方法建立AS模型，同時(shí)予RV(4mg/kg)灌胃6周；白藜三醇喂飼10周(Fed RV

3、For Ten Weeks)組，即T-RV組，除予S-RV組相同處理外，6周后改喂正常飼料，并繼續(xù)予RV(4mg/kg)灌胃4周，共予RV喂飼10周。圖象分析儀測(cè)血管壁內(nèi)膜，中膜厚度，采用免疫組織化學(xué)的方法檢測(cè)p-ERK及α-SMA的定位表達(dá)，用Western blot的方法檢測(cè)兔血管壁NQO2、GST-pi、ERK、p-ERK及α-SMA的表達(dá)情況，同時(shí)采用Habig法檢測(cè)GST-pi酶的活性，以觀白藜三醇抗動(dòng)脈粥樣硬化的作用是否與影

4、響該酶的活性有關(guān)。 結(jié)果： ①AS組TC、HDLC、LDLC、AI均較C組明顯升高(P<0.01)；T-RV組及S-RV組TC、LDLC、A工均較AS降低(P<0.05)，其中T-RV組的TC、LDLC較S-RV組下降(P<0.05)，各組間TG水平無(wú)明顯變化(P>0.05)。 ②AS組內(nèi)膜厚度、內(nèi)膜中膜厚度比，較C組明顯增加(P<0.05)，T-RV組、S-RV組內(nèi)膜厚度、內(nèi)膜中膜厚度比較C組明顯減低(P<0.

5、05)；T-RV組內(nèi)膜厚度較S-RV有下降趨勢(shì)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，各組間中膜厚度無(wú)明顯變化(P>0.05)。 ③α-SMA、p-ERK在AS組表達(dá)較C組明顯增加(P<0.05)，在T-RV組、S-RV組的表達(dá)較AS組明顯減少(P<0.05)；后兩組間α-SMA、p-ERK的表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 ④T-RV組、S-RV組GST-pi、NQO2的表達(dá)較AS組明顯增加(P<0.05)，前者間兩種

6、蛋白的表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，AS組GST-pi、NQO2的表達(dá)較C組減少，但未發(fā)現(xiàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。 ⑤ERK的表達(dá)、GST-pi酶的活性在各組間無(wú)明顯差異(P>0.05)。 ⑥NQO2，GST-pi的表達(dá)分別與p-ERK、α-SMA、內(nèi)膜厚度、內(nèi)膜/中膜厚度比呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)，p-ERK分別與α-SMA、內(nèi)膜厚度、內(nèi)膜/中膜厚度之間呈正相關(guān)(P<0.05)。 結(jié)論：

7、①高脂飲食聯(lián)合免疫損傷可誘導(dǎo)兔動(dòng)脈血管的粥樣硬化病變，使血脂升高、平滑肌細(xì)胞增殖、內(nèi)膜增生，對(duì)ERK、GST-pi、NQO2的表達(dá)及GST-pi酶的活性無(wú)明顯影響，但可促進(jìn)ERK的磷酸化。 ②白藜三醇可降低動(dòng)脈粥樣硬化兔的血脂(TC、LDLC)的水平，抑制血管壁ERK的磷酸化，進(jìn)而抑制血管平滑肌細(xì)胞的增殖及內(nèi)膜增生，從而發(fā)揮其抗動(dòng)脈粥樣硬化的作用。 ③白藜三醇抑制平滑肌細(xì)胞增殖，減輕內(nèi)膜增生與其上調(diào)血管壁NQO2、GST