PDTC對新生大鼠缺氧缺血后皮質和海馬CA1區(qū)NF-κB激活及神經細胞凋亡的影響.pdf

1、目的：新生兒缺氧缺血性腦損傷（HIBD）是新生兒死亡和永久性神經系統(tǒng)損傷的重要原因之一。越來越多的證據表明炎癥反應和凋亡在缺氧缺血性腦損傷的發(fā)病機制中起關鍵作用。NF-κB是廣泛存在于真核細胞內的一種很重要的轉錄因子，調控許多炎性和凋亡相關基因的表達，從而調控炎癥反應、免疫應答、細胞的增殖、分化和凋亡等重要的病理生理過程，對臨床許多疾病的發(fā)生及發(fā)展起重要作用，因此針對NF-κB的調控已成為目前許多疾病研發(fā)新藥治療的重要靶點。NF-κB活

2、化抑制劑吡咯烷二硫代氨基甲酸鹽（PDTC）在成年大鼠腦缺血再灌注模型中具有強大的神經保護作用，但有關PDTC對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷是否具有神經保護作用的研究在國內外尚為少見。本研究旨在建立新生SD大鼠缺氧缺血性腦損傷模型的基礎上，檢測新生大鼠在缺氧缺血（HI）后不同時間點大腦皮質和海馬CA1區(qū)NF-κBP65蛋白表達和神經細胞凋亡的變化，探討新生大鼠缺氧缺血后NF-κB的活化對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷的影響及PDTC預處理對新生大鼠

3、缺氧缺血性腦損傷是否具有神經保護作用及其作用機制。 方法：72只新生健康7日齡SD大鼠，雌雄兼用。隨機分為假手術組、HIBD組、PDTC預處理組，各組24只。每組大鼠再按缺氧缺血后1、6、12、24小時不同處死時間點隨機分為4個亞組，每個亞組6只。結扎大鼠左側頸總動脈和吸入含氧8%的氮氧混合氣體制備成新生大鼠HIBD模型。假手術組僅游離左頸總動脈但不結扎和行缺氧處理。PDTC預處理組大鼠在缺氧缺血前1小時給予PDTC腹腔注射1次

4、（50ug/g），假手術組和HIBD組大鼠均腹腔注射等體積生理鹽水。采用蘇木素-伊紅（HE）染色檢測缺氧缺血后腦組織病理學改變；用SP免疫組化染色方法檢測NF-κBP65蛋白的表達以了解NF-κB的活化；采用尼氏體（Niss1）染色檢測神經元變性和TUNEL細胞凋亡原位檢測技術檢測凋亡的神經細胞以評價缺氧缺血對腦組織的損傷。 結果：（1）與同時間點假手術組相比，HIBD組左側皮質和海馬CA1區(qū)NF-κBP65陽性細胞數和神經細胞

5、凋亡數均顯著增多（P<0.01或P<0.001）；（2）與同時間點HIBD組相比，PDTC干預組左側皮質和海馬CA1區(qū)NF-κBP65陽性細胞數和神經細胞凋亡數顯著減少（P<0.05或P<0.01）；（3）HIBD組內HI6h、12h、24h各亞組左側皮質和海馬CA1區(qū)NF-κBP65陽性細胞數、神經細胞凋亡數與HI1h亞組相比，均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；（4）直線相關性分析表明缺氧缺血后凋亡神經細胞數與NF-κBP65蛋白核陽