靶向抑制滑膜細胞TNF-α基因表達的siRNA篩選及鑒定.pdf

1、目的:設計并篩選能高效抑制創(chuàng)傷性關節(jié)炎滑膜細胞腫瘤壞死因子α（Tumor Necrosis Factor-α，TNF-α）表達的最佳干擾序列，為進一步研究TNF-α基因對創(chuàng)傷性關節(jié)炎的臨床應用奠定基礎。
　　方法:根據人源TNF-α mRNA的序列，設計合成3對不同的且能干擾TNF-α基因表達的小型干擾RNA(small interfering RNA，siRNA)序列，將其轉染人創(chuàng)傷性關節(jié)炎滑膜細胞，培養(yǎng)48h后，采用RT-PC

2、R方法檢測細胞上清液中TNF-α mRNA表達水平，采用ELISA方法檢測細胞上清液TNF-α表達水平。
　　結果:與對照組相比，3對siRNA中有2對siRNA可有效使人滑膜細胞中TNF-α mRNA表達減少(P＜0.01)，同時細胞上清液中TNF-α分泌量下降，與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。
　　結論:成功設計合成了靶向TNF-α基因的siRNA，并從中篩選出能特異且高效阻斷TNF-α表達的siRNA，為