特異性抑制Rho-ROCK信號通路對脊髓星形膠質(zhì)細胞增殖的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:采用Y27632特異性抑制Rho/ROCK信號通路,觀察該干預對體外培養(yǎng)的脊髓星形膠質(zhì)細胞增殖的影響,并進一步探討其影響增殖的可能機制。
　　方法:原代培養(yǎng)大鼠的脊髓星形膠質(zhì)細胞,實驗分為對照組(正常培養(yǎng)基)和Y27632干預組(培養(yǎng)基中含10μMY27632);在不同時間點(0、6、12、24和48h),計數(shù)各組細胞的數(shù)量,應用流式細胞技術檢測細胞周期的分布,westernblot檢測星形膠質(zhì)細胞細胞周期相關蛋白(cycl

2、inD1、cyclinE、CDK4、P27)和p-ERK的表達情況,進一步采用熒光免疫細胞染色法檢測實驗組攝取Brdu的細胞比例與ERK信號途徑的關系。
　　結(jié)果:與對照組相比,Y27632干預組細胞數(shù)量顯著增加(6、12、24和48h)(P<0.05),同時處于S期細胞的百分率明顯上升(6h和12h,P<0.05);在不同的時間點,Y27632組細胞周期相關蛋白(cyclinD1、CDK4,cyclinE)及p-ERK1/2的表

3、達量明顯高于對照組;與對照組相比,Y27632干預組BrdU(+)的細胞比例在6、12、24h點明顯增加(P<0.05),同時給予Y27632和ERK抑制劑U0126的干預時BrdU(+)的細胞比例無明顯增加。
　　結(jié)論:Rho/ROCK信號通路特異性抑制劑Y27632可以顯著促進體外培養(yǎng)脊髓星形膠質(zhì)細胞的增殖和細胞周期的進展,提示Rho/ROCK信號通路參與了脊髓星形膠質(zhì)細胞細胞的增殖;Rho/ROCK信號通路可能通過調(diào)控下游的

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