水孔蛋白-1在人腹膜組織中的表達(dá)及與腹膜透析的關(guān)系.pdf

1、研究目的 水孔蛋白(Aquaporins，AQPs)是一組對(duì)水高度選擇性的細(xì)胞膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，在維持機(jī)體水平衡中起重要作用。迄今已發(fā)現(xiàn)14個(gè)同源異構(gòu)體，水孔蛋白-1(Aquaporin-1，AQPl)是最早被發(fā)現(xiàn)的該家族成員。研究證實(shí)腹透時(shí)滲透梯度作用下水的轉(zhuǎn)運(yùn)主要通過(guò)AQP1進(jìn)行，AQP1被認(rèn)為是腹膜跨細(xì)胞的水轉(zhuǎn)運(yùn)通道。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察AQP1在人腹膜組織的表達(dá)，研究其與腹透超濾量及尿量的關(guān)系，進(jìn)一步證實(shí)AQP1在腹膜透析的選擇及轉(zhuǎn)

2、歸中的臨床意義。 方法： 1．于尿毒癥患者行首次腹膜透析置管術(shù)時(shí)及維持性腹膜透析患者拔管或再次置管時(shí)取腹膜活檢標(biāo)本，另取非尿毒癥腹部手術(shù)患者的腹膜標(biāo)本作為正常對(duì)照，排除任何可能累及腹膜的疾病。 2．采用免疫組化鏈霉菌抗生物素蛋白．過(guò)氧化物酶連結(jié)法(Streptavidin-Perosidase，SP)及半定量評(píng)分系統(tǒng)檢測(cè)尿毒癥患者及非尿毒癥患者腹膜AQPl蛋白的表達(dá)。 3．采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(Reve

3、rsed Transcript Polymerase Chain Reaction，RT-PCR)方法分析尿毒癥患者及非尿毒癥患者腹膜AQPlmRNA的表達(dá)。 4．收集患者臨床資料，追蹤調(diào)查尿毒癥患者腹膜透析后的超濾量、尿量情況。 5．分析比較非尿毒癥者與尿毒癥患者AQP1的表達(dá)，分析AQP1與透析患者的營(yíng)養(yǎng)狀況、炎癥反應(yīng)、內(nèi)生肌酐清除率、腹透超濾量及尿量的關(guān)系。 結(jié)果： 1．免疫組化結(jié)果顯示：毛細(xì)血管和

4、小靜脈內(nèi)皮細(xì)胞染色陽(yáng)性，而小動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞無(wú)染色，間皮細(xì)胞染色也呈陽(yáng)性。在所有活檢標(biāo)本中內(nèi)皮細(xì)胞AQP1表達(dá)較間皮細(xì)胞明顯增多，兩者比較有顯著差異(t=7.491，p=0.000)。 2．正常對(duì)照組與尿毒癥組AQP1的表達(dá)正常對(duì)照組與尿毒癥患者組．AQPl的表達(dá)差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3．殘余腎功能對(duì)AQP1表達(dá)的影響以尿毒癥患者腹膜透析置管術(shù)前最后一次化驗(yàn)血肌酐水平計(jì)算肌酐清除率(Creatinine clearance r

5、ate，Ccr)，Ccr>10ml/min者與Ccr≤10ml/min者AQP1表達(dá)差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 4．營(yíng)養(yǎng)狀況對(duì)AQP1表達(dá)的影響以尿毒癥患者腹膜透析置術(shù)前最后一次化驗(yàn)血白蛋白水平作為評(píng)價(jià)營(yíng)養(yǎng)狀況的指標(biāo)，AQP1的表達(dá)與血白蛋白水平無(wú)明顯相關(guān)，每袋超濾量和每日超濾量與血白蛋白水平無(wú)明顯相關(guān)。 5．炎癥反應(yīng)對(duì)AQP1表達(dá)的影響以尿毒癥患者血C反應(yīng)蛋白(CRP)水平作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，AQPl的表達(dá)與血CRP水平無(wú)明顯相關(guān)，

6、每袋超濾量和每日超濾量與血CRP水平無(wú)明顯相關(guān)。 6．AQP1的表達(dá)和腹膜轉(zhuǎn)運(yùn)的相關(guān)性所有患者每3月進(jìn)行一次隨訪(fǎng)，選取患者腹膜透析植管術(shù)后3個(gè)月第一次隨訪(fǎng)時(shí)的超濾量及尿量進(jìn)行分析。 分析AQP1表達(dá)量與每袋超濾量之間的關(guān)系(均選取使用1.5％腹透液保留時(shí)間4小時(shí)透析的患者計(jì)算每袋超濾量)，AQP1表達(dá)量與每袋超濾量之間無(wú)明顯相關(guān)。 AQP1表達(dá)量與每日超濾量之間無(wú)明顯相關(guān)。 AQP1表達(dá)量與每日尿量之間無(wú)