轉基因棉花材料獲得及主要農藝性狀變異分析.pdf

1、隨著植物基因工程的發(fā)展，人們已成功地將抗蟲基因導入棉花，并育成了許多抗蟲棉花品種。棉花在遺傳轉化過程中產生了一些可以穩(wěn)定遺傳的變異，豐富了棉花的遺傳資源，對這些材料進行全面系統(tǒng)的分析具有很重要的意義。本實驗室在規(guī)?；D基因過程中，通過花粉管通道法和農桿菌介導法獲得了大批的變異材料，在田間農藝性狀穩(wěn)定，為轉基因變異規(guī)律的研究提供了材料基礎。對穩(wěn)定的轉基因變異材料進行全面系統(tǒng)的調查分析，為功能基因的研究提供一定的理論基礎。 本實驗通

2、過花粉管通道法和農桿菌介導法對三種抗蟲基因(單價抗蟲基因(SCK)、雙價抗蟲基因(Bt+CpTI)和三價抗蟲基因(Bt+CpTI+GNA))進行了遺傳轉化，并對轉基因植株T1代進行了田間卡那霉素鑒定和生物鑒定。同時測定了苗期Bt毒蛋白含量，對以上鑒定呈陽性的材料進行PCR檢測，選擇有目的基因插入的單株，從中篩選出一批抗蟲的變異材料。 研究結果發(fā)現(xiàn)，不同目地基因對轉化率的影響不大。對不同世代的Bt毒蛋白的表達穩(wěn)定性進行了分析，結果

3、顯示，T3和T5代的毒蛋白含量要高于T1代，轉化方法對毒蛋白的表達量影響不大。T5代轉基因變異群體的抗性和農藝性狀已經穩(wěn)定，毒蛋白表達均高于1500ng/g。對T5代穩(wěn)定轉基因變異群體進行了農藝性狀分析，發(fā)現(xiàn)兩種轉基因方法獲得的轉基因植株均產生了廣泛的變異?？偨Y了兩種轉化方法下產生的變異類型：包括葉綠素含量、葉片大小、株高、果枝數(shù)、結鈴數(shù)、產量等變異。兩種轉化方法出現(xiàn)的相同變異有：株高變異都呈現(xiàn)出兩種趨勢，生育期也出現(xiàn)了相同的變異，變異

4、株系的產量均高于對照，馬克隆值均變大等。不同趨勢的變異為：花粉管通道法轉化的中99668葉片變小，果枝數(shù)增加，而農桿菌介導法轉化的中棉所24的變異趨勢與之相反。篩選出一批抗蟲且豐產、早熟、纖維品質好變異性狀穩(wěn)定的后代，為育種工作提供了有用的遺傳材料。 篩選出的這些突變體材料，是棉花突變體研究的寶貴資源。可以有針對性地進行功能基因的研究。它們已經具有抗蟲基因作為標簽，可以通過分子標記、Tail-PCR等手段克隆相關基因。有了這些突