轉錄因子Slug在早孕小鼠子宮內膜的表達及功能研究.pdf

1、Slug是Snail鋅指轉錄因子家族成員之一，參與調控胚胎發(fā)育和腫瘤的發(fā)生。Slug基因在物種進化過程中比較保守，有高度保守的C2H2型鋅指結構域，通過連接到E-box以抑制靶基因的轉錄。Slug編碼的轉錄因子表達在不同組織發(fā)育的各階段，對于原腸胚和中胚層的形成都是必需的，可促進上皮細胞-間充質細胞轉換（epithelial-mesenchymal transition，EMT）和抑制上皮細胞鈣粘蛋白（E-cadherin）在內的黏附分

2、子和上皮細胞標記物，而促進細胞的遷移。在EMT過程中，Slug通過對E-鈣粘蛋白的下調，促進上皮向間質轉化。許多研究表明，Slug是E-鈣粘蛋白啟動子的抑制子，參與控制細胞分化和凋亡的不同進程，并與腫瘤進展和侵襲有關。 胚胎植入（embryo implantation）是哺乳動物生殖過程中一個至關重要的環(huán)節(jié)，是建立成功妊娠的第一步。在植入過程中胚胎與子宮都處在生長發(fā)育的動態(tài)階段，而胚胎的侵入性和子宮內膜的接受性必須達到“同步”才

3、能保證植入成功，這段關鍵時期稱植入窗或著床窗。胚胎侵入性和子宮內膜接受性都與細胞分化或發(fā)育狀態(tài)有關。細胞在生長發(fā)育過程中有兩種主要表型，即上皮型和間充質型，并能進行上皮間充質表型轉換。子宮內膜上皮細胞在接受性的獲得過程中，極性結構逐漸消失，特征性蛋白（如鈣粘蛋白、波形蛋白）表達改變，甚至還發(fā)生行為變化，以利于滋養(yǎng)層細胞侵入。然而，滋養(yǎng)層細胞與腫瘤細胞一樣，其侵襲能力受細胞外基質、基質金屬蛋白酶、細胞黏附分子以及其它生長因子的調控[8]。

4、 最近幾年，Slug轉錄因子在腫瘤發(fā)生和侵襲過程中的作用已被提出并大量研究，由于胚胎植入與腫瘤侵襲過程很大程度上具有相似性[8]，Slug是否在胚胎植入過程中起一定作用，對其進行研究將具有很重要的意義。 目的：研究轉錄因子Slug在小鼠子宮內膜表達的規(guī)律性變化及其對胚胎植入的影響，初步探討它在小鼠生殖中的作用。 方法： 1.收集未孕和早孕1、2、3、4、5、6、7天小鼠子宮內膜，共8組，每組20只小鼠。（

5、1）運用實時熒光定量聚合酶鏈反應（FQ-PCR）技術測定Slug mRNA的表達規(guī)律；（2）免疫組織化學SP法檢測小鼠子宮內膜中Slug蛋白的表達情況。 2.于孕3天晚8時小鼠子宮角注射Slug抗體，于孕8天觀察著床胚泡數(shù)。 結果： 1.FQ-PCR：早孕小鼠子宮內膜和未孕小鼠子宮內膜均有SlugmRNA表達，早孕小鼠子宮內膜組織Slug的表達高于未孕小鼠子宮內膜組織，且隨著妊娠天數(shù)的增加呈現(xiàn)逐漸增加的趨勢，到孕

6、4天達到最高。 2.免疫組織化學：Slug蛋白在子宮內膜廣泛表達，特別是腔上皮、腺上皮細胞，基質細胞表達也較豐富，Slug蛋白的表達規(guī)律與mRNA結果基本一致。 3.于孕3天晚8時子宮角注射Slug抗體，觀察結果顯示注射Slug抗體組著床胚胎數(shù)明顯減少，差異顯著（p<0.05）。 結論：Slug在孕4天高表達，Slug的高表達抑制E-cadherin的表達以利于上皮細胞向間質細胞轉化，增加滋養(yǎng)層細胞侵襲能力的同時