朱砂葉螨對丁氟螨酯的抗性形式遺傳及抗性穩(wěn)定性研究.pdf

1、朱砂葉螨(Tetranychus cinnabarinus)是一種重要的農(nóng)業(yè)害螨，可為害豇豆、茄子、花卉等百余種農(nóng)業(yè)、經(jīng)濟作物。該螨具有繁殖力強、世代周期短、活動范圍小等生物學(xué)特點，加之殺螨劑大量不科學(xué)的使用，使其抗藥性問題尤為嚴重。丁氟螨酯是一種新型殺螨劑，在我國上市晚，還未廣泛使用。該藥劑殺螨活性高，對非靶標生物安全，具有成為未來主流殺螨劑的潛力。本論文通過長期在室內(nèi)進行朱砂葉螨對丁氟螨酯的抗性篩選，分析了朱砂葉螨丁氟螨酯抗性品系的

2、抗性遺傳方式、適合度、抗性穩(wěn)定性，并評估了丁氟螨酯的抗性風險，研究結(jié)果為丁氟螨酯的合理使用以及抗性治理的有效開展奠定了理論基礎(chǔ)。本文主要研究內(nèi)容與結(jié)果如下：
　　1.以敏感品系（SS）為源頭，室內(nèi)經(jīng)過97代篩選獲得丁氟螨酯抗性品系（CyR），其LC50值由2.19mg/L上升到58.80mg/L，相對于室內(nèi)敏感品系抗性倍數(shù)為26.85倍。
　　2.利用丁氟螨酯抗性品系與敏感品系進行雜交和回交，明確其抗藥性遺傳形式，結(jié)果表明：

3、F1代正交（CyR_80♀×SS♂）及反交（SS♀×CyR_80♂）所得顯性度DRS和DSR分別為-0.24和-0.32，表明朱砂葉螨對丁氟螨酯的抗性為不完全隱性遺傳；t測驗得出正反交所得D值的95％置信限重疊，不存在顯著性差異，表明抗性基因位于常染色體上；回交F2代期望值與實際LD-P曲線及χ2值存在明顯差異，表明抗性受多對等位基因控制。
　　3.通過構(gòu)建抗性品系（CyR）與敏感品系（SS）的生命表，逐日統(tǒng)計其生長發(fā)育情況，計算

4、生物學(xué)參數(shù)，發(fā)現(xiàn) CyR品系的生殖力及存活率均低于 SS品系，相對適合度（RR/SS）Rf=0.88<1，表明CyR品系存在一定的抗性適合度代價。
　　4.通過從 CyR_85中分出一支亞系，去除其藥劑篩選壓，研究了朱砂葉螨對丁氟螨酯的抗性穩(wěn)定性。主要以下三方面來評價：
　　首先在藥劑敏感性方面，抗性亞系（CyR_D）在停止藥劑篩選后僅過了5代，其LC50從47.34mg/L下降到11.35mg/L，抗性倍數(shù)從21.6倍下降

5、到5.2倍，12代后抗性倍數(shù)又下降至3.8倍，表明去除藥劑壓力后，CyR_D對丁氟螨酯的藥劑敏感性逐漸恢復(fù)。
　　其次從生理生化方面，CyR_D在停止藥劑篩選的情況下僅過了5代，三大解毒酶GSTs、MFO、CarE酶活性均發(fā)生顯著性下降，12代后MFO和CarE酶活性下降到敏感水平。表明去除藥劑壓力后，CyR_D解毒酶活性會逐漸下降。
　　分子生物學(xué)方面，結(jié)合高通量測序及qPCR驗證的結(jié)果，鑒定出10條可能與丁氟螨酯抗性相關(guān)

6、的解毒酶基因，在停止篩選后的不同階段測定其mRNA表達量，發(fā)現(xiàn)TCGST-M2、TCGST-M3、TCGST-M4，TCCarE-4、TCCarE-14，CYP389C11、CYP392D6、CYP385C2，8條原本顯著性上調(diào)表達的基因在停止篩選12代后表達量較原表達水顯著性下降，2條顯著性下調(diào)的基因TCCarE-12、TCCarE-23較原表達水平顯著上升，表明去除藥劑壓力后，CyR_D解毒酶基因mRNA表達量呈現(xiàn)不穩(wěn)定性，會逐漸變

7、化至與敏感品系相當?shù)乃健?br>　　藥劑敏感性，解毒酶活性及相關(guān)解毒酶基因mRNA表達量三方面的結(jié)果均表明朱砂葉螨對丁氟螨酯的抗藥性不穩(wěn)定。
　　5.應(yīng)用數(shù)量遺傳學(xué)方法估算出朱砂葉螨丁氟螨酯抗性品系的抗性現(xiàn)實遺傳力h2=0.005，表明其對丁氟螨酯的抗性發(fā)展較為緩慢?？剐燥L險評估表明，在70%-90%致死率的藥劑篩選壓力下，朱砂葉螨對丁氟螨酯產(chǎn)生10倍抗性需13-36代。通過測定朱砂葉螨丁氟螨酯抗性品系與5種不同作用殺蟲殺螨劑的