蹄葉橐吾化學(xué)成分與抗氧化作用研究.pdf

1、蹄葉橐吾 Ligularia fischeri(Ledeb) Turcz.為菊科橐吾屬多年生草本植物，使用歷史悠久，在我國各地區(qū)均有廣泛應(yīng)用，極具開發(fā)價(jià)值。本課題以采自吉林省延邊朝鮮自治州圖們市的蹄葉橐吾全草為研究對(duì)象，對(duì)其化學(xué)成分及抗氧化作用進(jìn)行了系統(tǒng)研究。
　　對(duì)蹄葉橐吾甲醇提取物及石油醚、二氯甲烷、正丁醇和水等不同溶劑萃取物，通過二苯代苦味肼基自由基[1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl(DPPH)]清

2、除實(shí)驗(yàn)方法，評(píng)價(jià)它們的抗氧化作用。結(jié)果蹄葉橐吾的甲醇提取物和正丁醇萃取物具有較強(qiáng)的抗DPPH自由基活性，其半數(shù)有效值IC50分別為13.24和3.70μg/mL。
　　以氯仿為溶劑超聲提取蹄葉橐吾的脂溶性成分，利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀對(duì)提得物質(zhì)進(jìn)行分離和鑒定，采用色譜峰面積歸一化法確定脂溶性各組成成分的相對(duì)含量。結(jié)果共分離出33個(gè)峰，鑒定了其中19個(gè)成分，占脂溶性總成分的71.58％。
　　采用硅膠柱層析、Sephadex

3、LH-20及半制備高效液相色譜儀等方法從蹄葉橐吾中分離得到6個(gè)化合物，并運(yùn)用光譜分析技術(shù)ESI-MS、1H-NMR、13C-NMR、2D-NMR等進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定，分別為：金絲桃苷（1）、2''-乙酰金絲桃苷（2）、3-羰基-8α-甲氧基-10αH-1,7(11)-二烯-12,8β-內(nèi)酯-艾里莫酚倍半萜（3）、橐吾醛（4）、β-谷甾醇（5）、胡蘿卜苷（6）。其中化合物1、2為從該屬植物中首次分離，化合物3為從該植物中首次分得的化合物。

4、r>　　在系統(tǒng)研究化學(xué)成分的基礎(chǔ)上，建立了蹄葉橐吾中金絲桃苷和2''-乙酰金絲桃苷的高效液相色譜含量測定方法。對(duì)金絲桃苷和2''-乙酰金絲桃苷進(jìn)行同步含量測定，以乙腈-水（23:77）為流動(dòng)相，檢測波長為354 nm，采用峰面積外標(biāo)法計(jì)算含量。結(jié)果金絲桃苷平均含量（n=6）為0.387 mg/g，RSD為0.52%；2''-乙酰金絲桃苷平均含量（n=6）為0.526 mg/g，RSD為1.29%。
　　活性研究方面，采用總抗氧化能

5、力測定、羥自由基測定、DPPH自由基清除實(shí)驗(yàn)等體外抗氧化活性評(píng)價(jià)方法，對(duì)蹄葉橐吾的甲醇總提物、各萃取部位以及分離純化出的單體化合物進(jìn)行測定。三種方法結(jié)果一致，均顯示蹄葉橐吾甲醇總提物、正丁醇和水萃取物，金絲桃苷和2''-乙酰金絲桃苷具有較好的抗氧化能力。
　　綜上，利用不同的分離方法從蹄葉橐吾中分離、鑒定了極性不同的各成分，建立了蹄葉橐吾中金絲桃苷和2''-乙酰金絲桃苷的高效液相色譜含量測定方法，并評(píng)價(jià)了蹄葉橐吾的甲醇總提物、各萃