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文檔簡介
1、臍帶間充質(zhì)干細胞(Human Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells,hUC-MSCs)具有較強的增殖能力、多向分化潛能、來源廣泛等特點,因而逐漸成為間充質(zhì)基礎及臨床研究領(lǐng)域的熱點。在對間充質(zhì)干細胞的生物學特征的研究中,許多研究發(fā)現(xiàn)間充質(zhì)干細胞中表達了一些胚胎干細胞特異的轉(zhuǎn)錄因子,但這些研究結(jié)果容易受到不同轉(zhuǎn)錄剪切體或假基因的干擾而得到假陽性的結(jié)果。對于NANOG表達情況的研究,就受到了NANOG眾多
2、假基因的干擾。在人基因組中,NANOG基因有11個假基因,其中一些基因具有一定的轉(zhuǎn)錄活性,有的基因甚至還能編碼蛋白質(zhì),有的NANOG假基因編碼的蛋白質(zhì)和NANOG基因編碼的蛋白質(zhì)相似度還非常高。本文主要研究探求hUC-MSCs中NANOG及其假基因的表達情況,并進行了如下研究,以便為hUC-MSCs在臨床應用的安全性提供依據(jù)。
首先,我們采用酶消化的方法,從人的臍帶組織之中分離得到了臍帶間充質(zhì)干細胞,經(jīng)過體外培養(yǎng)后的該類細胞的
3、增殖能力良好,并且在誘導條件下具有成脂、成骨、成軟骨的多向分化潛能,能夠滿足國際細胞治療協(xié)會提出的對于人類間充質(zhì)干細胞表面分子標記的要求。
然后,我們采用PCR聯(lián)合測序的方法,研究了hUC-MSCs中NANOG基因及其假基因的表達情況。通過對NANOG基因特異的5'UTR特異擴增分析,我們發(fā)現(xiàn),NANOG基因只在胚胎干細胞中表達,在臍帶間充質(zhì)干細胞、骨髓間充質(zhì)干細胞、Hela細胞、KB細胞中,都未檢測到NANOG基因特異的5'
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