當歸多糖對大鼠肝性腦病的預防作用及其機制的實驗研究.pdf

1、目的：我國是肝病患者人數眾多的國家，許多慢性肝病患者最終發(fā)展到肝硬化，并發(fā)肝性腦病(hepatic encephalopathy，HE)，生存率低，預后差，嚴重影響人的壽命和生存質量，而目前尚沒有一種治療肝硬化和HE的特效藥物，對HE的病理生理機制和治療藥物的研究還在不斷探索中。目前的普遍觀點認為高血氨在HE的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。氨通過血腦屏障擴散入腦內，在谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase，GS)催化下，由三磷

2、酸腺苷供能與谷氨酸在星形膠質細胞中合成谷氨酰胺。星形膠質細胞是腦內唯一有GS的細胞，代表了腦內主要的氨解毒部位，又是攝取興奮性氨基酸谷氨酸的主要部位。在氨濃度增高時，星形膠質細胞腫脹，對神經元的營養(yǎng)支持減少，興奮性氨基酸谷氨酸攝取減少，持續(xù)刺激神經元。同時星形膠質細胞將氨與谷氨酸合成谷氨酰胺而解毒的作用也減弱，腦內氨濃度增加，由此形成惡性循環(huán)，打破這種循環(huán)可能是治療HE和改善HE癥狀的一個途徑。 當歸多糖(Angelica Si

3、nensis Polysacchride，ASP)是我國傳統(tǒng)中藥當歸中主要的水溶性成分，具有多種功效。ASP從當歸中提取，不管是總多糖還是其多糖各組分，都對肝臟損傷有治療作用。ASP可以干預小鼠的急性酒精性肝損傷，增加肝能量儲備和對抗脂質過氧化。ASP還對小鼠四氯化碳性肝損傷有良好的保護作用，可降低血谷草轉氨酶和肝臟谷胱甘肽s-轉移酶活性。因此本研究推測ASP對慢性四氯化碳中毒形成的肝硬化和HE可能有一定的治療作用。本實驗的目的即為研究

4、從當歸中提取的ASP，對四氯化碳誘導產生的肝硬化大鼠的作用，是否可以延緩HE的發(fā)生，及其可能的機制，為肝硬化HE的治療尋找一種新的途徑。 方法： 第一部分：用微波輔助水提醇沉法從當歸中提取ASP，用苯酚-硫酸法測定其中的總糖含量。 第二部分：S-Dawley大鼠，分為正常對照組和誘導組。誘導組用40％的四氯化碳溶液做皮下注射。63天后內毒素3mg/kg腹腔注射，觀察各組大鼠肝臟病理情況和大鼠腦電圖(electro

5、encephalogram，EEG)的特征有何差別。 第三部分：S-Dawley大鼠，分為正常組、陰性組、陽性藥物組、ASP10g/L組、ASP20g/L組、ASP40g/L組，除正常組外，其余均為肝硬化造模成功的大鼠。各組分別給與蒸餾水、蒸餾水、乳果糖、ASP10g/L液、ASP20g/L液、ASP40g/L液灌胃2周后，內毒素3mg/kg腹腔注射，記錄昏迷發(fā)生時間，測定各組大鼠的血氨、谷丙轉氨酶GPT、谷草轉氨酶GOT值，和

6、腦細胞凋亡數，星形膠質細胞數和腦組織谷氨酸轉運體(glutamate transporter,GLT)和GS含量。 結果： 第一部分：從當歸根中提取出當歸多糖，總多糖含量68％。 第二部分：誘導組大鼠肝臟有假小葉形成，肝硬化誘導成功，誘導組大鼠血氨值明顯高于誘導前(P＜0.01)。內毒素注射后，誘導組大鼠發(fā)生HE，腦電圖出現特征性曲線。正常組大鼠血氨值與實驗前比較無顯著性差異，內毒素注射后無昏迷，腦電圖正常。

7、 第三部分：陽性藥物乳果糖和ASP各劑量組都可以延緩肝硬化大鼠HE的發(fā)生，降低血氨、GPT、GOT值，減少腦細胞凋亡，增加星形膠質細胞的數量，增加腦組織GLT和GS的含量，ASP40g/L溶液在延緩HE發(fā)生和降低血氨、GOT值，減少腦細胞凋亡，增加星形膠質細胞數和GLT含量上和乳果糖比較有顯著性差異(P＜0.05)。 結論：當歸多糖對四氯化碳造成的肝硬化有作用，可延緩HE的發(fā)生，其機制可能是改善肝功能，降低血氨、GPT、GO