血栓微顆粒誘導大鼠冠狀動脈微血栓形成的機制及意義.pdf

1、目的：建立血栓微顆粒誘導大鼠冠狀動脈微血栓形成的動物模型；探討血栓微顆粒誘導大鼠心臟心內膜下微血管內血栓形成的機制；評價冠狀動脈微血栓形成對大鼠心功能的影響。 方法：大鼠隨機分為冠狀動脈微血栓組(模型組)、假手術組和正常對照組。鉗夾升主動脈后自主動脈根部注入自身血栓微顆?；蛏睇}水0.2ml/只。取術后存活大鼠隨機分為6組，每組6只。分別于術后1h、1d、1w、2w、3w和4w取標本；每只大鼠處死前應用高頻數(shù)字超聲心動圖儀評價其

2、心功能的進行性改變；HE染色觀察心內膜下微血管內血栓形成情況并計數(shù)有血栓形成的微血管數(shù)量；酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法(ELISA法)檢測血清中血管性假血友病因子(VonWillebrand因子，vWF)含量；RT-PCR半定量檢測心臟組織中fgl2凝血酶原酶基因的表達水平。 結果：①HE染色結果顯示，模型組大鼠心肌心內膜下微血管內有血栓形成，部分血栓與內膜緊密粘連。模型組中有血栓形成的微血管數(shù)量明顯多于假手術組(23.06％±1.

3、73％vs5.72％±2.02％，P＜0.01)，而假手術組和正常對照組差異無統(tǒng)計學意義(5.72％±2.02％vs2.15％±1.01％，P＞0.05)。②大鼠血清中血管性假血友病因子(VonWillebrand因子，vWF)含量在注入血栓微顆粒后1h達到最高，1d后含量稍下降，但仍顯著高于正常對照和其它各組(P均＜0.05)。其心臟組織中fgl2凝血酶原酶mRNA的表達水平也在注入血栓微顆粒后1h達最高，至術后4w仍持續(xù)表達，且與血

4、清中vWF含量變化高度相關。③冠狀動脈微血栓形成后1d，與假手術組和正常對照組比較，F(xiàn)S值降低(45.95％±1.77％vs51.8％±3.25％、57.30％±1.41％，P＜0.05)，EF值降低(82.78％±2.40％vs90.35％±0.21％、91.08％±1.07％，P＜0.05)；冠狀動脈微血栓形成后4w，與形成后1d組、假手術組和正常對照組比較，LVIDd顯著增加(6.65mm±0.21mmvs5.25mm±0.21m

5、m、5.40mm±0.46mm、4.70mm±0.28mm，P均＜0.05)，F(xiàn)S值顯著降低(31.60％±0.56％vs45.95％±1.77％、51.50％±4.20％、57.30％±1.41％，P均＜0.05)，EF值顯著降低(65.46％±0.48％vs82.78％±2.40％、87.81％±2.45％、91.08％±1.07％，P均＜0.05)。 結論：1.注入大鼠冠狀動脈微血管內的自體血栓微顆粒促發(fā)了心肌局部的原位血

6、小板纖維蛋白性血栓形成，成功建立了大鼠冠狀動脈微血栓模型。2.血栓微顆粒誘導冠狀動脈微血栓形成可能是通過活化大鼠心臟心內膜下微血管內皮細胞和fgl2凝血酶原酶的途徑實現(xiàn)的：推測冠狀動脈微血管內皮細胞活化導致fgl2凝血酶原酶首先在轉錄水平上表達增高，再進一步增加凝血酶原酶的合成，以不同于經典凝血途徑的方式，直接激活凝血系統(tǒng)，參與大鼠冠狀動脈微血管內血栓形成。3.冠狀動脈微血栓形成后，在慢性心肌缺血的過程中發(fā)生了心室重塑，導致大鼠心功能呈