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文檔簡介
1、目的:本研究主要為人臍帶間充質(zhì)干細胞的分離、培養(yǎng)、鑒定建立一套完整的SOP標(biāo)準(zhǔn)化體系,為人臍帶間充質(zhì)干細胞實驗室轉(zhuǎn)化提供安全性的證據(jù),為人臍帶間充質(zhì)干細胞成功應(yīng)用于臨床研究打下堅實的基礎(chǔ)。
方法:人新鮮臍帶剝除血管,取其華通式膠,并采用機械方法進行培養(yǎng),并將其不同代數(shù)的細胞(P1-P9)進行病原學(xué)、形態(tài)學(xué)、流式學(xué)的檢測,以便明確所得細胞是否為間充質(zhì)干細胞,并對純度較高代數(shù)的細胞(P3-P6)進行增殖實驗、核型分析、急性毒性實驗
2、,慢性毒性實驗、過敏實驗、致瘤性進行相關(guān)的研究,以便明確臍帶間充質(zhì)干細胞的安全性。
結(jié)果:臍帶間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)方法成熟,細胞形態(tài)良好,病原學(xué)檢測未見細菌真菌以及其他病原,流式細胞學(xué)檢測細胞純度較高,細胞增殖實驗顯示細胞在3-4天達到一個增殖高峰,細胞核型分析未見到細胞染色體的丟失、畸形以及其他的變異,急性毒性實驗是安全的,慢性毒性實驗各組織器官切片未見異常,過敏實驗未見動物過敏及死亡情況,致瘤實驗未見注射部位形成腫瘤。
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