結直腸癌微衛(wèi)星不穩(wěn)定性研究及黃芩等中藥對錯配修復基因突變表型的影響.pdf

1、本研究應用熒光多重PCR和Genescan方法研究中國人結直腸癌患者MSI變異情況和臨床特征，以及黃芩、穿心蓮等中藥對錯配修復基因突變表型的影響，為中國人MSI結直腸癌遴選、發(fā)生機理和中藥治療的研究提供依據(jù)。第一部分中國人結直腸癌微衛(wèi)星不穩(wěn)定性研究目的 研究中國人結直腸癌MSI變異情況和MSI結直腸癌的臨床病理生物學特征。 方法 應用熒光多重PCR結合Genescan方法在105例結直腸癌初診患者中檢測5個微衛(wèi)星位點，篩選MS

2、I結直腸癌。分析MSI結直腸癌潛在的相關臨床病理生物學特征，包括腫瘤診斷年齡、性別、位置、病理性質(zhì)、組織分化程度、淋巴結轉移情況(0、1-3、≥4)。 結果105結直腸癌中，MSI檢出率24.7％，其中MSI-H14例(13.3％)，MSI-L12例(11.4％)；隊列中各位點突變率分別是D5S346(5.7％)、BAT26(8.6％)、BAT25(10.5％)、D17S250(8.6％)、D2S123(10.5％)；MSI檢出

3、頻率在低年組(31.8％)和高年組(26.2％)高于中位年齡組(19.5％)；結腸癌患者(34.2％)MSI檢出率明顯高于直腸癌患者(19.4％)；粘液腺癌組(33.3％)MSI檢出率高于腺癌組(22.6％)：低分化組(38.2％)中MSI檢出頻率明顯高于中分化組(18.2％)與高分化組(18.8％)：MSI結直腸癌中淋巴結轉移為15.3％，MSS結直腸癌淋巴結轉移為29.15％。MSI結直腸癌的組織分化程度與淋巴結轉移情況與MSS結直

4、腸癌有顯著的統(tǒng)計學差異(P<0.05)，而年齡、腫瘤位置、病理性質(zhì)與MSI檢出率無顯著臨床意義(P>0.05)。 結論 中國人MSI結直腸癌檢出率為24.％；MSI結直腸癌有其獨特的臨床生物學特征，具有低分化癌多見，淋巴結轉移少等特點，淋巴結轉移少可能是MSI結直腸癌具有生存優(yōu)勢的原因之一。第二部分 黃芩等中藥對錯配修復基因缺失結腸LoVo細胞的作用研究[摘要]目的 研究黃芩、穿心蓮誘導錯配修復基因hMSH2缺失的結腸LoV

5、o細胞凋亡作用，觀察中藥對MSI表型的影響，探討黃芩、穿心蓮對LoVo細胞的作用機理。方法采用體外培養(yǎng)技術、TUNEL法觀察細胞凋亡率、變性凝膠電泳檢測微衛(wèi)星標志BAT-25、D2S123狀況。 結果黃芩、穿心蓮、阿斯匹林均能誘導LoVo細胞和HCT-8細胞凋亡，與對照組有顯著差異(p<0.001)：陽性細胞標志指數(shù)視不同的藥物而存在較大的差異，黃芩對結腸LoVo細胞的誘導凋亡作用較穿心蓮強(p<0.01)，其作用時間在96h達

6、到高峰，與時間不呈依賴關系；相同濃度黃芩作用于LoVo細胞較HCT-8細胞強，兩組細胞間存在顯著差異(p<0.01)。穿心蓮誘導結腸HCT-8細胞凋亡的作用較黃芩和阿斯匹林強(p<0.01)，且呈時間依賴，一周時全部細胞凋亡，與相同濃度的穿心蓮作用于LoVo細胞相比存在顯著差異(p<0.01)。LoV0細胞表現(xiàn)為MSI，HCT-8細胞表現(xiàn)為MSS，黃芩、穿心蓮對兩組細胞的微衛(wèi)星狀態(tài)沒有影響。 結論 黃芩、穿心蓮能夠誘導Lovo