抑制Cdc6表達可提高非小細胞肺癌細胞系H460對化療藥物的敏感性.pdf

1、背景：
　　我國是肺癌高發(fā)的國家，其發(fā)病率和病死率都呈上升的趨勢，其中80％為非小細胞肺癌（NSCLC），早期診斷困難，絕大部分已失去了手術的機會,化療是晚期 NSCLC患者的主要治療手段之一。但是化療耐藥往往使得肺癌的治療效果不佳，生存率并沒有得到明顯的提高。大部分化療藥物是通過特異性或非特異性地作用于細胞周期某一特定位點，起到殺死腫瘤細胞的目的。Cdc6是細胞周期調控主要因子之一，它的異常表達與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有一定的關系。那么

2、，干擾Cdc6的表達，是否能夠提高化療藥物對肺癌的敏感性呢？
　　方法：
　　通過 western blot和Q-PCR的方法，檢測了非小細胞肺癌細胞株 H460、A549、SPC-A-1、NCI-H520中Cdc6的蛋白和基因表達情況。最后選取表達量最高的H460細胞株用于后續(xù)的干擾和藥敏實驗。首先用瞬時轉染的方法導入Cdc6-siRNA，并通過western blot和Q-PCR的方法驗證Cdc6蛋白和基因表達的抑制情況

3、。同時，也分別導入miR26a及miR26b的模擬物，觀察Cdc6蛋白和基因表達的抑制情況。抑制Cdc6的表達后，用MTT的方法，比較干擾前后H460對化療藥物吉西他濱和多烯紫杉醇敏感性的變化。
　　結果：
　　在非小細胞肺癌細胞株A549、H460、NCI-H520中Cdc6的蛋白和基因都呈高表達，且呈正相關。其中H460細胞株中Cdc6的表達量最高。H460細胞株轉染Cdc6-siRNA后，蛋白和基因的表達水平都有明顯的

4、下降。同時我們也發(fā)現(xiàn)，導入miR26a及miR26b的模擬物后，Cdc6的蛋白和基因水平也有明顯下降，與轉染Cdc6-siRNA后起到相關的作用效果。Cdc6表達的下降后，期對化療藥物吉西他濱和多烯紫杉醇的IC50有明顯的下降，及藥物的敏感性有明顯的提高，結果都具有明顯的統(tǒng)計學上的差異（P<0.05）。
　　結論：
　　本研究發(fā)現(xiàn) Cdc6在非小細胞肺癌細胞株中呈高表達趨勢。下調 Cdc6的表達后，非小細胞肺癌細胞株H460