全反式維甲酸通過GPI-PLD抑制細(xì)胞增殖的研究.pdf

1、目的:觀測(cè)分化誘導(dǎo)劑全反式維甲酸(all-transretinoic acid，ATRA)處理HL-60細(xì)胞株后，HL-60細(xì)胞中糖基化磷脂酰肌醇特異性磷脂酶D(glycosylphosphatidylinositolspecific phospholipase D，GPI-PLD)的表達(dá)變化，以初步探討GPI-PLD在ATRA作用下的變化及其與抑制白血病細(xì)胞增殖分化的關(guān)系。
　　 方法:用ATRA處理HL-60細(xì)胞后，RT-P

2、CR法確定GPI-PLD mRNA表達(dá)水平，并以胎盤型堿性磷酸酶為底物，定量檢測(cè)GPI-PLD活性;ELISA檢測(cè)GPI-PLD釋放糖基化磷脂酰肌醇(GPI)錨定蛋白質(zhì)CEA和CD87的量;MTT檢測(cè)ATRA處理后HL-60細(xì)胞的增殖活性，細(xì)胞計(jì)數(shù)繪制生長(zhǎng)曲線;流式細(xì)胞儀檢測(cè)ATRA處理后HL-60的細(xì)胞周期。
　　 結(jié)果:加入全反式維甲酸處理后，HL-60細(xì)胞株中GPI-PLD表達(dá)量急劇增加且活性增強(qiáng);GPI錨定蛋白質(zhì)CEA和

3、CD87的釋放量增加。MTT和細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)顯示ATRA處理后HL-60細(xì)胞株增殖生長(zhǎng)受到抑制。流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示細(xì)胞阻滯在G2/M期。
　　 結(jié)論:ATRA可以誘導(dǎo)白血病細(xì)胞系HL-60細(xì)胞中GPI-PLD表達(dá)增加且酶活性增強(qiáng)。HL-60中GPI-PLD的表達(dá)和活性被ATRA誘導(dǎo)增加后，可導(dǎo)致HL-60細(xì)胞膜上GPI錨定的蛋白質(zhì)CEA和CD87水解釋放。HL-60細(xì)胞中GPI-PLD的表達(dá)和活性被ATAR誘導(dǎo)增加后，可影響H