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文檔簡介
1、第一部分間充質干細胞對大鼠肝移植后急性移植物抗宿主病的預防作用及其機制研究
實驗目的:急性移植物抗宿主病(LTx-aGVDH)是一種肝移植后嚴重的并發(fā)癥,其發(fā)病率低(1-2%),但是死亡率卻極高,并且缺乏有效的治療手段。我們在前期研究中已經建立起了大鼠LTx-aGVHD模型,并發(fā)現(xiàn)其病情進展同體內調節(jié)性T細胞下降有關。間充質干細胞(MSC)具有免疫調節(jié)作用,近來已被用于治療骨髓移植后的GVHD。
材料與方法:大鼠LT
2、x-aGVHD模型建立成功后,于移植后當天至移植后第6天連續(xù)注射供體或受體來源的MSC,通過大體表現(xiàn)及病理檢測觀察大鼠生存情況;通過免疫組化、流式細胞分析等檢測大鼠體內調節(jié)性T細胞情況;并通過體外MSC同淋巴細胞共培養(yǎng)研究MSC對調節(jié)性T細胞的調節(jié)作用。
結果:注射供體或受體來源MSC的受體大鼠存活時間顯著長于對照組,且長期存活受體未表現(xiàn)出明顯的GVHD癥狀。免疫組化及流式細胞分析顯示治療組受體體內調節(jié)性T細胞的數量及比例顯著
3、高于對照組。體外MSC同淋巴細胞共培養(yǎng)證實MSC可以誘導調節(jié)性T細胞比例上調并抑制效應性T細胞增殖。
結論:在大鼠肝移植模型中,注射供體或受體來源的MSC均可有效預防肝移植后急性移植物抗宿主病的發(fā)生。
第二部分曲古抑菌素A對大鼠肝移植后急性移植物抗宿主病的作用及其機制研究
實驗目的:急性移植物抗宿主病(LTx-aGVHD)是肝臟移植后罕見但致命的嚴重并發(fā)癥。在前面的研究中我們已經發(fā)現(xiàn)LTx-aGVHD病程的
4、進展伴隨著調節(jié)性T細胞比例的降低。組蛋白去乙?;敢种苿┍话l(fā)現(xiàn)可以促進調節(jié)性T細胞的產生,而如異羥戊酸(SAHA)、曲古抑菌素A(TSA)這些組蛋白去乙酰化酶抑制劑已經用于治療自身免疫性疾病,包括骨髓移植后的移植物抗宿主病。
材料與方法:大鼠LTx-aGVHD模型建立成功后,于移植后第8天至第14天連續(xù)注射TSA,通過大體表現(xiàn)及病理檢測觀察大鼠生存情況,通過PCR、Western Blotting、流式細胞分析等檢測大鼠體內調
5、節(jié)性T細胞情況;并通過體外培養(yǎng)脾臟T淋巴細胞研究TSA對LTx-aGVHD治療的作用機制。
結果:經TSA治療后的大鼠均發(fā)生了典型的LTx-aGVHD癥狀,并最終死亡。經TSA治療后的大鼠外周血單個核細胞中的調節(jié)性T細胞比例略有上調,然而體內外結果均證實TSA可顯著降低Foxp3蛋白及mRNA的表達水平。體外研究進一步發(fā)現(xiàn),TSA會損傷T細胞增殖能力以及炎性細胞因子的產生能力。
結論:TSA不能緩解LTx-aGVHD
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